在海洋生物中，七鳃鳗是现存脊椎动物门中最古老的物种，它印记了无脊椎动物的进化史，又为脊椎动物的起源与进化提供丰富的遗传信息基础。本书介绍了本课题组近几年在七鳃鳗功能基因和比较基因组研究方面的主要成果，包括七鳃鳗的形态解剖，肝脏和口腔腺组织的cDNA文库的构建及分析以及与抗炎、抗凝、抗肿瘤、抗心血管疾病相关的基因克隆，重组蛋白表达、纯化及生物学活性测定及作用机制研究，旨在为深入研究疾病的治疗和新药的研发提供理论基础。另外，本书所提供的研究方法也会为科研工作者及相关专业研究生提供有益的借鉴。 本书可供功能基因及比较基因组学研究相关的科研工作者、教师及相关专业研究生和本科生参考使用。
样章试读
目录
前言
1 日本七鳃鳗形态解剖学研究
1.1 引言
1.1.1 无颌类的形态特征
1.1.2 无颌类的食性
1.1.3 无颌类的生活史
1.1.4 无颌类的分类依据及我国的主要种类
1.2 日本七鳃鳗的研究价值
1.2.1 七鳃鳗化石与基因的研究揭示脊椎动物颌形成的机制
1.2.2 七鳃鳗脑的个体发育重演了脊椎动物脑的系统发育
1.2.3 七鳃鳗幼鳗的胰岛器官是脊椎动物胰岛器官系统发育的最简单阶段
1.2.4 小结
1.3 日本七鳃鳗消化系统形态学研究
1.3.1 材料和方法
1.3.2 结果
1.3.3 讨论
1.4 日本七鳃鳗消化系统组织学研究
1.4.1 材料和方法
1.4.2 结果
1.4.3 讨论
1.5 日本七鳃鳗消化系统组织化学研究
1.5.1 材料和方法
1.5.2 结果
1.5.3 讨论
1.6 日本七鳃鳗消化系统亚显微结构研究
1.6.1 材料和方法
1.6.2 结果
1.6.3 讨论
1.7 结论
2 日本七鳃鳗口腔腺表达序列标签分析
2.1 引言
2.1.1 EST技术简介
2.1.2 EST技术的研究方法
2.1.3 EST的主要应用
2.1.4 EST研究的局限性
2.1.5 七鳃鳗EST研究现状
2.2 日本七鳃鳗口腔腺cDNA文库的构建
2.2.1 材料与方法
2.2.2 结果
2.2.3 讨论
2.3 日本七鳃鳗口腔腺表达序列标签的获得与分析
2.3.1 材料与方法
2.3.2 结果
2.3.3 讨论
2.4 日本七鳃鳗口腔腺分泌物成分与EST序列的比对分析
2.4.1 材料和方法
2.4.2 结果
2.4.3 讨论
2.5 结论
2.5.1 完成了cDNA文库的后续处理和序列测定工作
2.5.2 完成了对所获表达序列标签的同源性比对分析
3 日本七鳃鳗肝脏表达序列标签分析与比较转录组研究
3.1 引言
3.2 日本七鳃鳗肝脏cDNA文库的构建与EST测序
3.2.1 材料与方法
3.2.2 cDNA文库的质量鉴定
3.2.3 讨论
3.3 日本七鳃鳗肝脏表达序列表达标签(EST)分析
3.3.1 方法
3.3.2 结果与分析
3.3.3 讨论
3.4 结论
3.4.1 完成了cDNA文库的构建和后续序列测定工作
3.4.2 完成了对所获表达序列标签的生物信息学分析
4 日本七鳃鳗类淋巴细胞特异性免疫相关基因的差异表达
4.1 引言
4.1.1 无颌类脊椎动物免疫器官的进化
4.1.2 无颌类脊椎动物淋巴细胞的进化
4.1.3 无颌类脊椎动物免疫相关因子的研究
4.1.4 无颌类脊椎动物适应性免疫机制
4.1.5 限制片段差异显示聚合酶链反应在基因差异表达方面的研究
4.1.6 讨论
4.2 日本七鳃鳗类淋巴细胞的分离、纯化及细胞学特征
4.2.1 材料与方法
4.2.2 结果
4.3 日本七鳃鳗类淋巴细胞的异质性分析
4.3.1 材料与方法
4.3.2 结果
4.3.3 讨论
4.4 RFDD-PCR方法分析日本七鳃鳗类淋巴细胞特异性免疫相关基因的差异表达
4.4.1 材料与方法
4.4.2 结果
4.4.3 讨论
4.5 结论
4.5.1 成功分离和纯化日本七鳃鳗的类淋巴细胞,并确定其单个核细胞层的最佳分离液相对密度为1.092
4.5.2 从细胞形态和组织化学研究等侧面分析了七鳃鳗类淋巴细胞的异质性
4.5.3 RFDD-PCR方法建立日本七鳃鳗类淋巴细胞特异性免疫相关基因的表达谱并筛选得到VLR同源基因
5 脊椎动物激肽原基因的系统发育分析
5.1 引言
5.1.1 哺乳动物激肽原基因研究概况
5.1.2 非哺乳动物激肽原基因研究进展
5.1.3 小结
5.2 脊椎动物激肽原基因的系统发育分析
5.2.1 材料和方法
5.2.2 结果
5.2.3 讨论
5.2.4 小结
5.3 日本七鳃鳗肝脏组织中激肽原基因的克隆与分析
5.3.1 材料和方法
5.3.2 结果
5.3.3 讨论
5.3.4 小结
5.4 结论
6 日本七鳃鳗口腔腺分泌液纤溶酶活性及其组分的分离鉴定
6.1 引言
6.1.1 酶原型嵌合体纤溶酶——Pro-ACLF
6.1.2 特异识别纤维蛋白型嵌合体纤溶酶
6.1.3 抗凝血酶型嵌合体纤溶酶
6.1.4 抗血小板聚集型嵌合体纤溶酶——Fibrolase嵌合体衍生物
6.1.5 抗凝血酶和抗血小板聚集型多效嵌合体纤溶酶
6.1.6 展望
6.2 日本七鳃鳗口腔腺分泌液纤溶酶及组织溶解活性的研究
6.2.1 材料和方法
6.2.2 结果
6.3 日本七鳃鳗口腔腺分泌液BGSP-1的纤溶酶活性的研究
6.3.1 材料与方法
6.3.2 结果
6.4 讨论
6.5 结论
7 三种重组七鳃鳗RGD毒素蛋白对HeLa、HepG2细胞的活性影响
7.1 引言
7.1.1 RGD肽与整合素识别机制研究进展
7.1.2 有关Fgγ400-411序列和Aα572-575(RGDS)序列在整合素介导的细胞黏附方面的研究
7.1.3 总结
7.2 重组七鳃鳗RGD毒素蛋白的生物信息学分析
7.2.1 方法
7.2.2 结果
7.2.3 讨论
7.3 七鳃鳗RGD毒素蛋白rLj-RGD1、rLj-RGD2、rLj-RGD3的表达/纯化与鉴定
7.3.1 材料与方法
7.3.2 结果
7.3.3 讨论
7.4 rLj-RGD1、rLj-RGD2、rLj-RGD3的生物学活性
7.4.1 材料与方法
7.4.2 结果
7.4.3 讨论
7.4.4 结论
8 日本七鳃鳗口腔腺Grimin基因的生物学活性研究
8.1 引言
8.1.1 GRIM-19蛋白的基因特点及其在真核生物中的同源性
8.1.2 GRIM-19的组织分布、细胞与染色体定位
8.1.3 GRIM-19的生物学功能
8.2 日本七鳃鳗口腔腺新功能基因Grimin的克隆及序列分析
8.2.1 材料与方法
8.2.2 结果
8.3 Grimin的诱导表达、鉴定与纯化
8.3.1 材料与方法
8.3.2 结果
8.3.3 讨论
8.4 Grimin对人白血病细胞HL60及人脐静脉血管内皮细胞ECV304的生物学活性
8.4.1 材料与方法
8.4.2 结果
8.5 脂质体转染法转染人宫颈癌HeLa细胞和肝癌HepG2细胞后细胞凋亡活性的检测
8.5.1 材料与方法
8.5.2 结果
8.5.3 讨论
8.6 Grimin多克隆抗血清的制取及效价测定
8.6.1 材料与方法
8.6.2 结果
8.6.3 讨论
8.7 结论
9 重组日本七鳃鳗口腔腺分泌L-250蛋白基因克隆及HRF活性鉴定
9.1 引言
9.1.1 TCTP的空间结构特点
9.1.2 TCTP合成的调控
9.1.3 TCTP的生物学特性及功能
9.1.4 非哺乳动物TCTP的研究
9.1.5 日本七鳃鳗口腔腺分泌TCTP的研究
9.2 日本七鳃鳗口腔腺分泌L-250蛋白的基因克隆
9.2.1 材料和方法
9.2.2 结果
9.3 TCTP的生物信息学分析
9.3.1 对TCTP蛋白系统演化关系进行分析
9.3.2 对rLj-TCTP蛋白的理化性质预测
9.3.3 对rLj-TCTP蛋白的结构特征预测
9.3.4 对rLj-TCTP蛋白的三级结构预测
9.4 重组日本七鳃鳗口腔腺分泌L-250蛋白的诱导表达、鉴定与纯化
9.4.1 材料与方法
9.4.2 结果
9.4.3 讨论
9.5 兔抗七鳃鳗血清L-250蛋白多克隆抗体的制备与免疫印迹分析
9.5.1 材料和方法
9.5.2 结果
9.5.3 讨论
9.6 日本七鳃鳗口腔腺分泌L-250蛋白的HRF活性
9.6.1 材料和方法
9.6.2 结果
9.6.3 讨论
9.7 rLj-TCTP蛋白刺激大鼠腹腔肥大细胞释放组胺
9.7.1 材料与方法
9.7.2 结果
9.7.3 讨论
9.8 rLj-TCTP对HUVEC、HeLa细胞增殖及其凋亡的影响
9.8.1 材料与方法
9.8.2 结果
9.8.3 讨论
9.9 结论
10 日本七鳃鳗口腔腺分泌蛋白L251的表达纯化及生物学活性鉴定
10.1 引言
10.1.1 CRISP家族蛋白成员及其分布
10.1.2 CRISP家族蛋白的结构特点
10.1.3 CRISP家族蛋白的功能
10.1.4 CRISP的应用展望
10.2 基因序列进化分析,L251蛋白的表达及纯化
10.2.1 材料和方法
10.2.2 结果
10.2.3 讨论
10.3 中性粒细胞跨血管内皮细胞迁移
10.3.1 材料和方法
10.3.2 实验结果
10.3.3 讨论
10.4 跨HUVEC单层细胞膜迁移实验
10.4.1 材料与方法
10.4.2 结果
10.4.3 讨论
10.5 L251对中性粒细胞呼吸爆发的抑制
10.5.1 材料和方法
10.5.2 结果
10.5.3 讨论
10.6 L251对中性粒细胞表面整合素表达的影响
10.6.1 材料和方法
10.6.2 结果
10.6.3 讨论
10.7 MTT法检测L251对T淋巴细胞增殖抑制
10.7.1 材料和方法
10.7.2 结果
10.7.3 讨论
10.8 细胞周期法检测T淋巴细胞增殖抑制
10.8.1 材料与方法
10.8.2 结果
10.8.3 讨论
10.9 结论
参考文献
彩图]]>
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