《PCR理论与技术》是《21世纪生物技术丛书》的一个分册,是分子生物学研究的重要理论和工具。该书第一版于2005年出版,随着当今生物技术的迅速发展和需求的日益扩大,现予以再版。第二版在第一版基础上主要增加了实验技术,从而使该书更具可操作性。
本书分上、下篇,共13章。上篇介绍PCR基础理论和技术操作知识,以及可能遇到的各种问题的处理方法。下篇介绍PCR技术的应用,特别是第二版中通过RT-PCR技术检测全横断损伤脊髓中TGF-β1表达的实例分析,系统阐述了从RNA提取、反转录、PCR引物设计到PCR扩增、电泳及图像分析等具体操作步骤,使学习者能够全面掌握RT-PCR技术,做到无师自通。本书是编者在一线长期从事分子生物学实验技术的总结,基本涵盖了目前实验室所需的PCR理论与技术,有较好的实用价值。
本书可供生物医学专业研究生、本科学生及从事分子生物学的科研人员阅读和实验时参考。
样章试读
目录
- 上篇 PCR的基本理论与技术
第一章 聚合酶链式反应
第一节 PCR技术的原理
第二节 PCR反应体系
第三节 PCR的反应温度和循环参数
第四节 PCR反应条件的优化
第五节 PCR产物的检测
第六节 PCR产物的纯化
第二章 DNA模板的制备及PCR技术中常见问题的处理
第一节 DNA模板的制备
第二节 PCR常见问题及处理
第三节 PCR技术中污染问题
第四节 PCR技术实验室的质量控制
第三章 原位PCR相关技术
第一节 原位PCR
第二节 原位PCR的分类
第三节 原位PCR技术
第四章 定量PCR技术
第一节 概述
第二节 基本概念
第三节 定量PCR技术基本原理
第四节 定量PCR技术的种类
第五节 定量PCR的主要影响因素
第六节 常用的定量PCR技术及其在临床上的应用
第七节 PCR产物的检测与定量技术
第八节 目前存在的问题及展望
第五章 其他相关PCR技术
第一节 反转录-聚合酶链反应
第二节 套式PCR
第三节 多重PCR
第四节 PCR结合等位基因特异性的寡核苷酸探针法
第五节 PCR结合序列特异性引物技术
第六节 单链构型多态性分析
第七节 限制性酶切片段长度多态性分析
第八节 MVR-PCR
第九节 RAPD技术
下篇 PCR相关技术的应用
第六章 PCR技术用于构建cDNA文库、测序及基因突变的检测
第一节 cDNA文库构建的基本技术
第二节 PCR测序
第三节 PCR技术用于基因突变的检测
第七章 PCR技术分析DNA序列多态性
第一节 DNA的两种多态性和遗传标记分类
第二节 PCR技术分析DNA序列多态性
第八章 用PCR技术分析VNTR和STR
第一节 概述
第二节 扩增片段长度多态性分析分型技术基本原理
第三节 用PCR技术分析小卫星VNTR基因座分型的基本技术
第四节 用PCR技术分析微卫星(STR)基因座
第九章 用PCR技术对性别染色体进行分析
第一节 概述
第二节 PCR扩增的基本方法
第三节 讨论
第十章 用PCR技术对动植物、微生物DNA进行分析
第一节 概述
第二节 实验方法与步骤
第三节 结果与讨论
第十一章 PCR技术检测CDK4敲入转基因鼠的基因型
第一节 实验原理
第二节 实验方法
第三节 实验结果
第四节 结果分析及注意事项
第十二章 PCR体系中模板DNA浓度与PCR扩增效率的关系
第一节 实验目的
第二节 实验方法
第三节 实验结果
第四节 结果分析
第十三章 RT-PCR技术检测全横断损伤脊髓中TGF-β1的表达
第一节 实验原理
第二节 实验设备、试剂及配制
第三节 实验步骤
第四节 实验结果
第五节 实验体会