本教程共4章,30个实验。主要介绍研究微生物细胞化学成分、微生物细胞结构、微生物代谢与微生物代谢调控的实验技术和方法。本教程选取的实验材料包括细菌、古菌、丝状真菌和酵母菌,生理类型包括白养型、异养型及光能营养型,实验技术则融合了微生物学、生物化学、遗传学、生物物理学、分子生物学、生物信息学等学科的研究技术和方法,力求综合分析和探讨微生物生命活动规律。本教程选编的实验力求体现教材的基础性、代表性、实用性和先进性。本教程对每个实验的实验原珥都作了较详细的论述,实验步骤清晰,每个实验都有思考题和参考文献。
样章试读
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总序
前言
第一章微生物细胞化学成分的分析1
实验一细菌细胞含水量与蛋白质含量的测定1
实验二细菌胞内辅酶I和辅酶Ⅱ浓度水平的检测10
实验三酵母菌细胞RNA提取与地衣酚测定法15
实验四法夫酵母菌细胞虾青素的提取及测定20
实验五极端嗜盐菌甘油二醚类衍生物的检测26
实验六真菌细胞中多糖成分的提取及单糖组分的测定32
第二章微生物细胞结构的分析39
实验七丝状真菌线粒体的提取及检测39
实验八酵母菌细胞壁的制备及多糖组分的检测44
实验九极端嗜盐菌紫膜的分离和提取51
实验十革兰氏阴性菌细胞壁外膜的分离和纯化58
第三章微生物代谢的分析61
实验十一翻转膜法测定细菌中的单价阳离子逆向转运蛋白活性61
实验十二根瘤菌接种豆科植物实验67
实验十三豆科植物根瘤菌共生体有效性测定71
实验十四反硝化细菌的培养及异化型硝酸盐还原作用的检测74
实验十五光合细菌的分离与纯化81
实验十六化能白养菌的分离与纯化88
实验十七微生物呼吸的测定96
实验十八乳酸发酵与乳酸茵饮料102
实验十九酒精发酵107
实验二十大肠杆菌细胞各组分中铁还原酶活性的检测109
实验二十一丝状真菌原生质体制备、融合及再生114
实验二十二细菌细胞内金属离子动态平衡的检测119
实验二十三葡萄糖苷酶BgIB在大肠杆菌中的异源表达、纯化124
实验二十四长侧翼同源区PCR法敲除枯草芽孢杆菌的目的基凶133
实验二十五环境样品宏基因组文库构建及功能基因的筛选139
实验二十六易错PCR致突变的反应体系设计与实验149
第四章微生物代谢调控的分析156
实验二十七深红红螺菌固氮酶合成和活性的调控及测定156
实验二十八培养条件对重组大肠杆菌生长及聚羟基烷酸产量和组成的影响163
实验二十九大肠杆菌p半乳糖苷酶的诱导合成和分解代谢物阻遏169
实验三十不同培养条件下细菌目的基因转录水平差异的分析174
附录l微生物细胞的收集和处理方法180
附录2利用KEGG数据库查询代谢途径信息简介182
附录3常见的市售酸碱的浓度188
附录4微生物生理学实验中常用的缓冲液和储存液的配制189
附录5极端嗜盐茵的种类及生理特征192
附录6离心机的转速、相对离心力和半径之间的换算关系194
附录7酸奶的检查指标195
附录8网筛的目数与孔径的关系196
附录9微生物的平板菌落计数法197
附录10微生物显微镜直接计数法198
图版