共聚焦显微镜技术
本书的目录和前言已译成中文，正文部分保留英文原版。另附北京大学医学部高级工程师何其华博士、第二军医大学电镜中心杨勇骥教授所作精彩导读。
伴随着愈加重要的价值和愈发浓厚的研究兴趣，共聚焦显微镜技术和其他重要的显微技术正在快速发展。共聚焦显微镜技术具有高分辨率特别是纵向高分辨率，以及数字图像三维层析的特点，被广泛用于生物医学、材料科学、微电子制造、精密测量等领域的检测与分析。
作为《实验室解决方案》（Reliable Lab Soulutions）系列丛书的分册，《共聚焦显微镜技术》收录了共聚焦显微镜横跨生命科学领域不同学科的广泛应用，展望了其迅速发展的前景。作者介绍了在原创刊物中未曾发表过的使用捷径和技巧，并将共聚焦显微镜技术与其他相关方法进行比较，从而帮助读者改进现有的操作步骤以及应用于新的研究。本书适合共聚焦显微镜领域的研究人员使用，亦可公生命科学各专业的学生、教师、研究人员参考。
样章试读
目录
- 编者
前言
第一部分 使用注意事项和设备原理
1.共聚焦显微镜的理论基础 Robert H.Webb
I.简介
II.光学切片
III.点扩散函数
IV.针孔
V.放大倍数
VI.显微镜的完整结构
VII.共聚焦显微镜的种类
VIII.多光子显微镜
IX.光源
X.非相干光源
XI.光漂白
XII.合轴
XIII.数值孔径
XIV.小结
参考文献
2.共聚焦显微镜获取生物信号时的注意事项 Hao He,Rose Chik Ying Ong,Kam Tai Chan,Ho Pui Ho,and Siu Kai Kong
I.简介
II.激光诱导荧光信号的增强
III.DMSO的含水量和染料负载的效率
参考文献
3.大容量存储器和数据处理 Guy Cox
I.大容量存储器
II.图像处理
附录
参考文献
4.共聚焦荧光显微镜的荧光抗淬灭剂 Miguel Berrios,Kimberly A.Conlon,and DaVid E.Colflesh
I.修订
II.简介
III.样品制备
IV.抗荧光淬灭剂
V.荧光衰减图像的采集
附录:供应商
参考文献
5.共聚焦显微镜的封片技术 Manabu Kagayama and Yasuyuki Sasano
I.简介
II.材料与方法
III.结果与讨论
参考文献
6.共聚焦显微镜样品的全组织包埋与厚片制备 Hisashi Hashimoto,Hiroshi Ishikawa,and Moriaki Kusakabe
I.修订
II.简介
III.固定
IV.切片
V.预处理
VI.荧光染色
VII.标记荧光明胶的血管模型
VIII.封片
IX.观察
附录
参考文献
7.利用共聚焦显微镜研究细胞结构和功能 Ghassan Bkaily and Danlelle Jacques
I.简介
II.样品制备
III.共聚焦显微镜的参数设置
IV.细胞器的荧光探针
V.体积扫描法和核内钙、钠和pH测量
VI.快速扫描成像
VII.细胞共培养
VIII.共聚焦显微镜的荧光探针负载
IX.小结
参考文献
8.激光扫描共聚焦显微镜与电子显微镜的结合 Xuejun Sun
I.修订
II.简介
III.实验步骤
IV.方法一:免疫金荧光法
V.方法二:抗生物素-生物素复合物法
VI.免疫细胞化学法的应用
VII.讨论与小结
参考文献
第二部分 功能方法
9.利用共聚焦显微镜进行体积测量 Carlos B.Mantilla,Y.S.Prakash,and Gary C.Sieck
I.简介
II.共聚焦显微镜光学系统的选择
III.利用共聚焦显微镜进行光学切片
IV.共聚焦体积测量中的误差估计
V.共聚焦显微镜在体积测量中的局限性
参考文献
10.利用共聚焦显微镜对吞噬作用进行定量分析 George F.Babcock and Chad T.Robinson
I.修订
II.利用共聚焦显微镜对吞噬作用进行定量分析
III.调理素和受体
IV.测量吞噬作用的方法
V.选择恰当的吞噬颗粒
VI.细菌的荧光标记
VII.仪器
VIII.内外粒子的区分
IX.利用共聚焦显微镜对吞噬作用进行定量分析
X.数据分析与解释
XI.小结
参考文献
11.受体-配体的内化作用 Guido Orlandini,Rita Gatti,Gian Carlo Gazzola,Alberico Borghetti,and Nicoletta Ronda
I.修订
II.简介
III.材料
IV.细胞培养
V.膜结合配体
VI.受体-配体的内化作用
VII.鉴别亚细胞结构的两步染色法
参考文献
12.利用双光子激发显微镜进行代谢定量成像研究 David W.Piston and Susan M.Knobel
I.简介
II.NAD(P)H自发荧光在代谢成像中的应用
III.双光子激发显微镜
IV.定量代谢成像的应用
参考文献
13.雄性激素受体的转运 Virginie Georget,Béatrice Terouanne,Jean-Claude Nicolas,and Charles Sultan
I.简介
II.GFP-AR质粒的构建和功能特性
III.GFP-AR的荧光定位和免疫荧光检测
IV.用于GFP成像的各种荧光显微镜技术
V.活细胞中GFP-AR的胞内动力学和定量分析
VI.GFP-AR的应用
参考文献
14.共聚焦显微镜:激肽释放酶与激肽受体 Kanti D.Bhoola,Celia J.Snyman,and Carlos D.Figueroa
I.前言
II.简介
III.方法和步骤
IV.共聚焦显微镜捕获组织激肽释放酶(蛋白酶)与激肽受体(肽受体)图像
V.共聚焦显微镜显示非固定细胞的蛋白酶和受体
VI.共聚焦显微镜显示固定细胞的蛋白酶和受体
参考文献
15.应用于活细胞和组织研究的多光子激发显微镜、共聚焦显微镜和光谱学:活体人皮肤的功能代谢成像 Barry R.Masters,Peter T.C.So,Ki Hean Kim,Christof Buehler,and Enrico Gratton
I.简介
II.基于NAD(P)H荧光的细胞代谢的功能性代谢成像
III.紫外共聚焦荧光显微镜与多光子激发显微镜的比较
IV.多光子激发显微镜的激光光源
V.脉冲补偿技术
VI.多光子激发显微镜
VII.同步多光子激发显微镜与反射光共聚焦显微镜
VIII.多光子激发显微镜的视频比率
IX.多光子激发显微镜在活体人皮肤研究中的应用:发射光谱法与荧光寿命测量
X.采用激光脉冲选择器减轻双光子激发对活样品的损伤
参考文献
16.研究活体人角膜的视频速率、扫描狭缝共聚焦显微镜:眼睛的三维共聚焦显微术 Barry R.Masters and Matthias Böhnke
I.眼睛的活组织显微镜检查:从狭缝灯到共聚焦显微镜
II.共聚焦显微镜的光学原理
III.物镜扫描共聚焦显微镜
IV.利用共聚焦显微镜研究角膜
V.利用光学低相干反射法进行角膜内测量定位
VI.共聚焦显微镜的临床检查技术
VII.扫描狭缝共聚焦显微镜进行临床诊断
VIII.三维共聚焦显微镜与活体眼组织的成像
参考文献
17.使用活体共聚焦神经成像(ICON)法进行哺乳动物中枢神经系统神经元的活体成像 Sylvia Prilloff,Petra Henrich-Noack,Ralf Engelmann,and Bernhard A.Sabel
I.修订
II.简介
III.仪器
IV.动物样本制备
V.ICON的应用及展望
VI.供应商
参考文献
18.共聚焦显微镜在病毒感染鉴别中的应用 David N.Howell and Sara E.Miller
I.简介
II.共聚焦显微镜
III.电子显微镜
IV.小结
参考文献
19.细胞膜转运 Sabine Kupzig,San San Lee,and George Banting
I.简介
II.方法
III.发展前景
参考文献
第三部分 绿色荧光蛋白
20.利用绿色荧光蛋白监测蛋白分泌 Christoph Kaether and Hans-Hermann Gerdes
I.简介
II.基本性分泌
III.调节性分泌
参考文献
21.增强型绿色荧光蛋白与其用于转录受体时的不稳定形式的比较 Xiaoning Zhao,Tommy Duong,Chiao-Chian Huang,Steven R.Kain,and Xian-qiang Li
I.简介
II.方法原理
III.步骤
IV.结论与备注
参考文献
22.绿色荧光蛋白测量蛋白质降解 Stephen R.Cronin and Randolph Y.Hampton
I.简介
II.HMG-CoA还原酶
III.Hmg2p-GFP报告蛋白
IV.Hmg2p-GFP的直接观测
V.流式显微荧光测量与荧光-激活细胞分选分析在细胞降解中的应用
VI.活体克隆中Hmg2p-GFP的直接检测
VII.警示与注意事项
参考文献
23.利用融合绿色荧光蛋白研究细胞核受体 Gordon L.Hager
I.简介
II.用GFP标记细胞核受体
III.融合嵌合体的特性
IV.受体标记荧光蛋白的选择
V.表达模式
VI.仪器
VII.未来发展潜力
参考文献
24.用绿色荧光蛋白轭合物检测G蛋白偶联受体的信号传导、脱敏和转运 Larry S.Barak,Jie Zhang,Stephen S.G.Ferguson,Stephane A.Laporte,and Marc G.Caron
I.简介
II.G蛋白偶联受体,G蛋白偶联受体激酶和β-抑制蛋白的性质
III.G蛋白偶联受体GFP融合蛋白、G蛋白偶联受体激酶和β-抑制蛋白的构建
IV.G蛋白偶联受体GFP融合蛋白、G蛋白偶联受体激酶和β-抑制蛋白的特性
V.仪器和方法学
VI.β2AR-GFP和Y326A-β2AR-GFP的细胞分布
VII.用G蛋白偶联受体激酶GFP融合蛋白和β-抑制蛋白检测受体活化作用
VIII.单细胞中β-抑制蛋白2-GFP迁移的分析
IX.局限性
X.小结
参考文献
25.单色和多色流式细胞仪检测荧光蛋白 Lonnie Lybarger and Robert CherVenak
I.修订
II.简介
III.荧光蛋白的选择
IV.哺乳动物细胞的转染
V.稳定的荧光蛋白表达
VI.荧光蛋白与普通荧光染料的结合
VII.小结
参考文献
26.水母绿色荧光蛋白:研究神经元中离子通道和第二信使的工具 L.A.C.BlaIr,K.K.Bence,and J.Marshall
I.简介
II.小脑颗粒神经元的原代培养
III.绿色荧光蛋白和目的基因的构建
IV.利用磷酸钙沉淀法进行神经元瞬时转染
V.细胞系中脂质体转染
VI.在生物学问题中的应用
参考文献
27.非洲爪蟾卵母细胞中绿色荧光蛋白与肌醇1,4,5-三磷酸腺苷受体的表达 Atsushi Miyawaki,Julie M.Matheson,Lee G.Sayers,Akira Muto,Takayuki Michikawa,Teiichi Furuichi and Katsuhiko MIkoshiba
I.简介
II.实验步骤
III.利用GFP评估非洲爪蟾卵母细胞中外源性蛋白的相对表达水平
IV.利用GFP定位非洲爪蟾卵母细胞中的IP_3R-Ca^2+库
参考文献
28.单个活细胞中Ca^2+、pH、电位和膜通透性的共聚焦成像 John J.Lemasters,Donna R.Trollinger,Ting Qian,Wayne E.Cascio,and Hisayu-ki Ohata
I.简介
II.利用共聚焦显微镜进行光学切片
III.预防光损伤和光漂白
IV.用于显微镜的细胞制备
V.多色荧光
VI.阳离子荧光基团的电位成像
VII.比例成像的原理
VIII.酯类负载荧光基团的区室化
IX.膜通透性
X.Ca^2+共聚焦成像
XI.小结
参考文献
第四部分 激光捕获显微切割技术
29.激光捕获显微切割技术及其在基因组学和蛋白质组学中的应用 James L.Wittliff
I.背景
II.人体组织切片的处理规定
III.激光捕获显微切割技术的其他应用
参考文献
30.激光显微切割在活体中的应用 Anette Mayer,Monika Stich,Dieter Brocksch,Karin Schütze,and Georgia Lahr
I.简介
II.第一步:细胞培养准备
III.第二步:捕获细胞的收集
IV.第三步:捕获细胞的再培养
V.应用前景
参考文献
31.利用激光捕获显微切割从石蜡切片中分离细胞核进行荧光原位杂交 Douglas J.Demetrick,Lisa M.DiFrancesco,and Sabita K.Murthy
I.简介
II.材料与方法
III.讨论
IV.解决问题的技巧
参考文献
索引
京公网安备 11010102004214号