本书是《21世纪生物技术系列》的一个分册，全书分上、下两篇。上篇介绍了基因的结构与功能、蛋白质的结构与功能、基因的调控等分子生物学的基本理论基因克隆的载体、基因克隆的工具酶等，以及基因克隆技术在诊断、治疗及生物制药中的应用与进展；下篇在基因构建、干细胞转染及纳米载体实验技术基础上还介绍了基于病毒载体的基因克隆、转染及过表达技术。 本书可供生物医学专业研究生、本科生及从事分子生物学研究的科研人员阅读和实验时参考。
样章试读
目录
- 上篇 基因克隆理论
第一章 概论
第一节 基因研究的历史回顾
第二节 遗传的物质基础
第三节 基因和基因克隆的概念
第四节 基因工程的研究内容和安全性
第二章 基因的结构和功能
第一节 核酸的结构和功能
第二节 遗传物质的组织结构
第三节 基因组的结构和功能
第三章 蛋白质的结构和功能
第一节 蛋白质的基本单位和分类
第二节 蛋白质的分子结构和理化性质
第三节 蛋白质的生物学功能
第四章 基因克隆中常用的工具酶
第一节 限制性核酸内切酶
第二节 DNA聚合酶
第三节 DNA连接酶
第四节 修饰酶
第五章 基因克隆的载体
第一节 质粒载体
第二节 噬菌体载体
第三节 病毒载体
第四节 其他载体
第六章 基因的表达和调控
第一节 原核生物基因的表达调控
第二节 真核生物基因的表达调控
第七章 基因克隆在治疗和诊断中的应用与进展
第一节 基因治疗研究进展
第二节 基因诊断的研究进展
第八章 基因克隆技术在生物制药中的应用
第一节 概况
第二节 基因工程药物
第三节 基因工程抗体
第四节 基因工程疫苗
第五节 核酸疫苗
第六节 生物医药的发展方向
下篇 基因克隆技术
第九章 分子生物实验中的常用仪器及试剂的配制
第一节 分子生物实验室的常规仪器及设备
第二节 常用试剂的配制
第十章 琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳
第一节 原理
第二节 琼脂糖电泳
第三节 聚丙烯酰胺凝胶电泳
第四节 电泳的影响因素
第五节 电泳中常用的指示剂和染色剂
第十一章 目的基因克隆
第一节 化学合成法获取目的基因
第二节 PCR扩增法获取目的基因
第三节 RT-PCR法获取目的基因
第十二章 载体的准备
第一节 感受态细胞的制备和质粒的转化
第二节 质粒DNA的提取
第十三章 目的基因与载体的连接
第一节 目的基因和载体的酶切
第二节 从凝胶中回收DNA
第三节 目的基因和载体的连接
第十四章 重组载体的检测
第一节 酶切和电泳检测
第二节 DNA序列测序鉴定
第十五章 重组载体的转染
第一节 磷酸钙共沉淀法
第二节 脂质体法
第三节 反转录病毒感染法
第四节 腺病毒载体转染法
第五节 结果和转染方法的选择
第十六章 重组体插入基因、RNA和表达产物蛋白质的检测
第一节 Southern blot
第二节 Northern blot
第三节 Western blot
第十七章 大鼠BDNF基因的构建及骨髓间充质干细胞转染
第一节 实验原理与实验目的
第二节 实验设备、试剂及配制
第三节 实验步骤
第十八章 纳米粒子介导人生存素基因修饰嗅鞘细胞实验
第一节 实验原理
第二节 实验所需设备、试剂及其配制
第三节 实验步骤
第四节 实验结果
第五节 结果分析
第十九章 小鼠NT-4基因的体外构建、骨髓间充质干细胞转染和脑内移植
第一节 实验目的及实验原理
第二节 小鼠NT-4基因的体外构建及骨髓间充质干细胞转染
第三节 NT-4-GFP转基因骨髓间充质干细胞脑内移植
第四节 结果分析与经验体会
第二十章 慢病毒携带人端粒酶基因hTERT的基因克隆技术
第一节 实验目的
第二节 实验设备、试剂及其配制
第三节 实验步骤
第四节 实验结果
第五节 结果分析
第六节 经验体会
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