本书系全国高等医药院校规划教材,可供高校基础和临床各专业开设微生物学实验课使用,也可作为微生物学临床检验人员的工具书和上岗培训用书。全书包括微生物实验基本技术,细菌学、真菌学及病毒学实验,各种临床标本检查,微生物非培养法鉴定技术和质量控制等7部分内容,分为50项共154个实验。内容涉及微生物学的实验原理和基本技术,各种微生物的系统检验,各种临床标本的检测方法,技术方法翔实,图文并茂。其中非培养法鉴定技术是针对难培养或不能培养微生物的感染难以进行病原学检测的瓶颈而设计的。并针对目前仍以微生物的分离培养作为病原学诊断的“金标准”,提出要以非培养法鉴定技术替代微生物的分离培养,建立新的病原学诊断“金标准”。要完成本教材全部实验内容约需120学时,各校可根据各自特点和专业要求选择适当的教学内容。
本书可供医药院校学生使用。另外,本书的技术和方法也可作为临床微生物检验的操作指南,也是广大微生物学工作者的参考用书。
样章试读
目录
- 微生物学实验室规则
第一部分 微生物实验的基本技术
第一实验 细菌的人工培养法
实验1 基础培养基的制备
实验2 细菌的分离与接种法
实验3 倾注培养和活菌计数
第二实验 细菌形态学检查法
实验4 显微镜的使用
实验5 细菌不染色标本检查法(悬滴法)
实验6 细菌涂片的制备及革兰染色法
实验7 细菌的基本形态和特殊结构观察
实验8 测微器的使用
第三实验 细菌生化鉴定法
实验9 单糖发酵试验
实验10 氧化酶试验
实验11 过氧化氢酶试验
实验12 IMViC试验
实验13 硫化氢试验
实验14 脲酶试验
实验15 数字编码测定法
第四实验 细菌血清学鉴定法
实验16 凝集试验
实验17 沉淀试验(毛细管法)
实验18 荚膜肿胀试验
第五实验 消毒与灭菌
实验19 常用消毒、灭菌法及除菌滤器的使用
实验20 常用化学消毒剂对细菌的影响
实验21 噬菌体的特异溶菌试验
第六实验 细菌抗生素敏感性测定
实验22 纸片扩散法
实验23 稀释法
实验24 E试验
第七实验 细菌的遗传与变异
实验25 细菌变异现象的观察
实验26 R质粒的传递试验
实验27 质粒DNA转化试验
实验28 细菌DNA提取
第八实验实验动物感染及细菌毒素检测
实验29 实验动物的管理与选择
实验30 动物接种与采血技术
实验31 细菌毒素检测
第二部分 细菌学实验
第九实验 球菌
实验32 葡萄球菌属
实验33 链球菌属
实验34 肺炎链球菌与甲型链球菌的鉴别
实验35 抗链球菌溶血素“O”试验
实验36 奈瑟菌属
第十实验 肠杆菌科Ⅰ
实验37 埃希菌属
实验38 沙门菌属
实验39 志贺菌属
实验40 肥达(Widal)试验
第十一实验 肠杆菌科Ⅱ
实验41 克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属
实验42 变形杆菌属与摩根菌属
实验43 小肠结肠炎耶尔森菌
第十二实验 弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属
实验44 霍乱弧菌
实验45 副溶血弧菌
实验46 气单胞菌属和邻单胞菌属
第十三实验 弯曲菌属和幽门螺杆菌
实验47 弯曲菌属
实验48 幽门螺杆菌
第十四实验 厌氧菌
实验49 厌氧芽孢梭菌
实验50 无芽孢厌氧菌
第十五实验 革兰阳性杆菌
实验51 棒状杆菌属
实验52 炭疽芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌
实验53 李斯特菌属
第十六实验 分枝杆菌属及需氧性放线菌
实验54 结核分枝杆菌
实验55 麻风分枝杆菌
实验56 诺卡菌属
第十七实验 非发酵革兰阴性杆菌
实验57 假单胞菌属
实验58 黄杆菌属
实验59 不动杆菌属
第十八实验 其他细菌
实验60 嗜血杆菌属
实验61 布鲁菌属
实验62 军团菌属
实验63 鲍特菌属、巴斯德菌属、弗朗西丝菌属
第十九实验 API鉴定系统在细菌学检验中的应用
实验64 API 20E系统用于肠杆菌科的鉴定
实验65 API 20NE系统用于非发酵菌的鉴定
实验66 API Rapid ID32A用于厌氧菌的鉴定
第二十实验 螺旋体
实验67 螺旋体的形态观察
实验68 钩端螺旋体
实验69 梅毒螺旋体
实验70 伯氏螺旋体
第二十一实验 支原体
实验71 肺炎支原体形态及菌落观察
实验72 肺炎支原体冷凝集试验
实验73 ELISA方法检测肺炎支原体IgG/IgA/IgM抗体
实验74 溶脲脲原体脲酶试验
第二十二实验 衣原体
实验75 衣原体包涵体的形态观察
实验76 直接免疫荧光法检测沙眼衣原体
实验77 ELISA法检测衣原体
实验78 细胞培养分离衣原体
第二十三实验 立克次体
实验79 立克次体的形态与染色
实验80 外斐反应
第三部分 真菌学实验
第二十四实验 真菌的基本性状
实验81 真菌染色及形态结构的观察
实验82 真菌的培养
实验83 真菌的生化及鉴定试验
实验84 真菌的药敏试验
第二十五实验 常见浅部真菌的鉴定
实验85 毛癣菌属
实验86 小孢子菌属
实验87 表皮癣菌属
第二十六实验 常见深部真菌的鉴定
实验88 假丝酵母菌属
实验89 隐球菌属
实验90 曲霉菌属
实验91 组织胞浆菌属
实验92 卡氏肺孢菌
实验93 API 20C AUX系统用于酵母样真菌的鉴定
第四部分 病毒学实验
第二十七实验 病毒的分离培养技术
实验94 病毒的动物接种法
实验95 鸡胚培养法
实验96 病毒组织培养法
实验97 水泡性口炎病毒在细胞上的感染性测定
第二十八实验 呼吸道病毒
实验98 流感病毒的分离与鉴定
实验99 ELISA间接法检测副流感病毒(PFV)血清IgM抗体
实验100 禽H5病毒核酸检测
第二十九实验 肠道病毒
实验101 肠道病毒的分离鉴定
实验102 轮状病毒的检测
第三十实验 甲型和戊型肝炎病毒
实验103 ELISA法检测甲型肝炎病毒IgM抗体
实验104 ELISA法检测HEV-IgG抗体
第三十一实验 乙型、丙型和庚型肝炎病毒
实验105 乙型肝炎病毒HBsAg、HBe-Ag、抗HBe和抗HBc检测
实验106 PCR 法检测HBV-DNA
实验107 斑点杂交法检测HBV-DNA
实验108 ELISA法检测HCV-IgM抗体
实验109 PCR 法检测HCV-RNA
实验110 ELISA法检测HGV-IgG抗体
第三十二实验 虫媒病毒
实验111 乙型脑炎病毒IgM抗体检测
实验112 登革病毒
第三十三实验 出血热病毒
实验113 免疫荧光法检测抗汉坦病毒IgM
实验114 ELISA法检测汉坦病毒特异性IgM
第三十四实验 疱疹病毒
实验115 抗单纯疱疹病毒抗体检查
实验116 PCR 法检测HSV-DNA
实验117 生物素-链霉亲和素系统ELISA检测抗巨细胞病毒抗体
实验118 免疫荧光法检测EBV IgA抗体
第三十五实验 人类免疫缺陷病毒
实验119 ELISA法检测HIV抗体筛选试验
实验120 WB法检测HIV抗体确认试验
第三十六实验 肿瘤病毒
实验121 WB法检测HTLV抗体试验
实验122 PCR法检测HPV-DNA
第五部分 各种临床标本的微生物学检查
第三十七实验 血液标本病原学鉴定
第三十八实验 粪便标本病原学鉴定
第三十九实验 尿液及生殖道标本
实验123 尿液标本病原学鉴定
实验124 生殖道标本病原学鉴定
第四十实验 痰液及呼吸道标本病原学鉴定
第四十一实验 脓汁标本的病原学鉴定
第四十二实验 无菌体液标本
实验125 脑脊液标本的病原学鉴定
实验126 穿刺液标本的病原学鉴定
第六部分 微生物非培养法鉴定技术
第四十三实验 临床标本的直接显微镜检查
实验127 微生物形态学检查
实验128 荧光抗体染色试验
实验129 病毒的电子显微镜观察
第四十四实验 微生物特异性蛋白质及抗原的检测
实验130 胶体金法检测衣原体
实验131 直接荧光抗体染色法
实验132 ELISA夹心法检测呼吸道合胞病毒抗原
第四十五实验 核酸检测技术
实验133 细菌的培养和破壁
实验134 DNA的提取
实验135 细菌DNA中G+Cmol%的测定
实验136 固相膜分子杂交
实验137 原位杂交
实验138 PCR技术
第四十六实验 微生物核蛋白体分类鉴定
实验139 16S rRNA的寡核苷酸序列分析
实验140 UPPCR-CE-RFLP法检测溶脲脲原体两个生物群
第四十七实验 气相与液相色谱技术
实验141 气相色谱
实验142 高效液相色谱
第四十八实验 发光分析技术
实验143 化学发光技术
实验144 生物发光技术
第七部分 质量控制和实验设计
第四十九实验 医院内感染监测与质量控制
实验145 空气消毒效果的监测
实验146 物体表面细菌污染监测
实验147 医护人员手细菌污染监测
实验148 使用中的消毒液与无菌器械保存液污染监测
实验149 压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测
实验150 紫外线灯的消毒效果监测
实验151 无菌试验
第五十实验实验设计
实验152 临床检测方案的设计
实验153 新方法、新技术的设计
实验154 暴发流行的实验室工作
附录
Ⅰ.实验室常用器材的处理与消毒灭菌
Ⅱ.常用培养基
Ⅲ.常用染色液
Ⅳ.常用试剂和溶液
Ⅴ.药敏试验用液及材料制备
Ⅵ.细胞培养常用试剂及培养液
Ⅶ.菌种保存与保管
参考文献
图版