本书在第一版基础上编写而成。全书结合理论教学和实验技术,具有目的清晰、原理明确、步骤详尽、图文并茂等特点。各章均有技术理论、实验原理、结果分析、思考题等。
全书分为两篇。第一篇分子生物学技术,共六章27个实验。涵盖了 DNA的制备和分析、DNA的克隆、PCR相关技术、RNA的制备和分析、核酸分子杂交技术和蛋白质电泳技术等。第二篇细胞生物学技术,共五章22个实验。除显微镜技术、组织培养等经典细胞生物学实验外,还有 GFP标记质膜蛋白的分选观察、细胞融合、细胞凋亡以及细胞培养与功能鉴定、细胞膜技术、细胞生理生化及植物转基因技术等。
本书适合普通高等院校生命科学领域教学用书,也可作为医学、农、林、综合性大学本科生和研究生有关课程的实验教材,也可供相关的科技人员参考使用。
样章试读
目录
- 前言
第一篇分子生物学技术
第一章DNA的制备和分析
实验1细菌质粒的制备和分析
实验2植物基因组DNA的制备和分析
实验3酵母DNA的制备
实验4入噬菌体DNA的提取和分析
第二章DNA的克隆
实验5DNA的限制酶剪切
实验6DNA片段的回收纯化
实验7载体与目的基因的体外重组
实验8重组DNA的转化和蓝白筛选
实验9真核基因在原核细胞中的表达
第三章PCR相关技术
实验10PCR法快速筛选阳性克隆
实验11转基因烟草的PCR检测
实验12逆转录PCR
实验13PCR产物的T/A克隆
实验14RACE法获得全长cDNA
第四章RNA的制备和分析
实验15植物组织总RNA的制备
实验16RNA的定量和完整性分析
实验17mRNA的分离和纯化
实验18表达型cDNA文库的构建
第五章核酸分子杂交技术
实验19同位素标记探针的分子杂交
实验20DIG标记探针的分子杂交
实验21噬菌斑的原位杂交
实验22Northern印迹杂交
第六章蛋白质电泳技术
实验23SDS-PAGE和蛋白分子量的测定
实验24IEF-SDS双向凝胶电泳
实验25肽质量指纹谱技术
实验26高效毛细管电泳分离蛋白质
实验27植物同工酶电泳分析
第二篇细胞生物学技术
第七章显微镜技术
实验28普通光学显微镜技术
实验29几种研究用显微镜技术
实验30电子显微镜技术
实验31电镜样品制备技术
第八章细胞培养与功能鉴定
实验32酵母细胞的培养与观察
实验33酵母细胞的异源功能互补
实验34植物细胞的悬浮培养
实验35植物原生质体的分离与培养
第九章细胞膜技术
实验36细胞膜的渗透性
实验37植物细胞质膜的分离和纯化技术
实验38带有GFP的质膜蛋白分选观察
实验39细胞的融合
第十章细胞生理生化
实验40离心技术与叶绿体的分离
实验41植物细胞氧化还原活性的测定
实验42核酸(DNA和RNA)的细胞核定位观察
实验43细胞骨架的光学显微镜观察。
实验44细胞凋亡小体和梯状DNA的诱导和观察
第十一章植物转基因技术
实验45农杆菌介导的叶盘法转化烟草
实验46基因枪转化技术
实验47瞬时表达分析启动子活性
实验48顺式元件与反式因子间的凝胶阻滞分析
实验49c-myc表位附加标签用于蛋白在亚细胞定位及westernblotting
检测
附录1有关核酸的常用数据
附录2与DNA凝胶电泳有关的数据
附录3缓冲液
附录4常用的生物酶类和抗生素类
附录5常用培养基
附录6用于噬菌体和酵母操作的溶液
附录7杂交实验中用于降低背景的封闭剂
附录8生物信息学常用数据库及其软件
附录9分子生物学有毒试剂的净化处理和安全使用