本书是由科学出版社申报,教育部组织专家评议审批的普通高等教育“十一五”国家级规划教材,也是我国第一本《植物基因工程》专业教科书。全书兼顾了植物基因工程的基础理论及技术原理和实验操作技术。理论部分系统详尽地讲解了植物基因工程相关知识,实验部分不仅列举了多种方案供读者根据需要自由选择或自我设计,还增加了实验结果分析,以利于学生开拓思路,培养举一反三的分析能力,真正掌握实验技能,学以致用。全书以植物基因工程的程序为主线循序展开,逐渐深入。既具有较高的理论性,又具有较强的实用性和可操作性,构成了独特的植物基因工程理论体系。
本书适合用作各大学生物专业,特别是农林院校植物育种专业的专业课教材,也可作为该专业研究生和科研工作者的参考书。
样章试读
目录
- 0 绪论:植物基因工程概述
0.1 植物基因工程的定义
0.2 植物基因工程的研究发展历史
0.3 植物基因工程的理论依据及技术路线
0.4 植物基因工程研究的内容
0.5 植物基因工程的发展现状及前景
复习题
第一篇 植物基因分子生物学
第1章 植物基因组的结构与功能
1.1 植物基因组与基因组学的基本概念
1.2 植物基因组的结构特点
1.3 植物细胞三套基因组的结构功能
1.4 植物细胞三套基因组的遗传关系
复习题
第2章 植物基因的分子结构与功能
2.1 植物细胞核基因的分子结构与功能
2.2 植物叶绿体基因的分子结构与功能
2.3 植物线粒体基因的分子结构与功能
复习题
第3章 植物基因的表达调控
3.1 植物基因表达的基本概念
3.2 植物基因表达的调控特点
3.3 基因表达调控的生物学意义
3.4 植物基因的转座
复习题
第二篇 植物基因工程的目的基因
第4章 抗植物虫害基因及其应用
4.1 bt基因及其应用
4.2 蛋白酶抑制剂基因及其应用
4.3 植物凝集素基因及其应用
4.4 淀粉酶抑制剂基因及其应用
4.5 胆固醇氧化酶基因
4.6 营养杀虫蛋白基因
4.7 系统肽基因
4.8 其他抗虫基因
4.9 非蛋白质类杀虫剂调控基因
4.10 抗虫基因的互补和协同作用
复习题
第5章 抗植物病毒基因及其应用
5.1 cp基因及其应用
5.2 病毒复制酶基因及其应用
5.3 病毒卫星RNA的利用
5.4 反义RNA介导抗病毒
5.5 缺陷型运动蛋白介导的抗病毒
5.6 植物体内的抗病毒基因
5.7 缺陷干扰颗粒抗病毒
5.8 核糖体失活蛋白基因及其应用
5.9 干扰素基因及其应用
复习题
第6章 抗植物真菌病害基因及其应用
6.1 几丁质酶基因与β-1,3-葡聚糖酶基因及其应用
6.2 植物抗毒素基因及其应用
6.3 来自植物的抗真菌病基因及其应用
6.4 rip基因及其抗真菌病的应用
6.5 过氧化物酶基因及其应用
6.6 SAR的抗病基因
复习题
第7章 抗植物细菌病害基因及其应用
7.1 病原菌自身的抗性基因及其应用
7.2 抗菌肽基因及其应用
7.3 溶菌酶基因及其应用
7.4 病原相关蛋白基因及其应用
7.5 防御素基因及其应用
7.6 植物保卫素及其合成酶基因
7.7 TLP蛋白基因及其应用
复习题
第8章 抗非生物胁迫基因及应用
8.1 耐除草剂基因及其应用
8.2 抗其他非生物胁迫的基因及其应用
复习题
第9章 提高作物产量、改良作物品质的基因及其应用
9.1 提高作物产量的基因及其应用
9.2 改良作物品质的基因及其应用
复习题
第10章 调控植物生长发育繁殖的基因及其应用
10.1 调控胚胎发生、形态建成的基因及其应用
10.2 植物激素基因对植物生长发育的调控及其应用
10.3 调控植物花色、花形、衰老的基因及其应用
10.4 植物雄性不育基因及其应用
复习题
第11章 植物医药基因工程及其应用
11.1 植物医药基因工程生物反应器
11.2 植物医药基因工程的表达系统
11.3 植物医药基因工程的内容及其应用
复习题
第三篇 目的基因的转化及其原理
第12章 植物基因工程载体及其构建
12.1 植物基因工程载体命名规则及种类
12.2 根癌农杆菌Ti质粒的结构与功能
12.3 农杆菌Ti质粒基因转化机理
12.4 农杆菌Ti质粒的改造及载体构建
12.5 载体构建中常用的选择标记基因及报道基因
复习题
第13章 植物基因转化受体系统的建立
13.1 植物基因转化受体系统的条件
13.2 植物基因转化受体系统的类型及其特性
13.3 植物基因转化受体系统建立的程序
13.4 植物基因转化受体系统建立的常见问题
复习题
第14章 根癌农杆菌Ti质粒介导基因转化
14.1 根癌农杆菌的生物学特性
14.2 根癌农杆菌侵染植物细胞的化学机制
14.3 根癌农杆菌的侵染能力及其特异性
14.4 根癌农杆菌转化程序及操作原理
14.5 根癌农杆菌Ti质粒转化的方法
14.6 根癌农杆菌转化系统的评述
复习题
第15章 发根农杆菌Ri质粒载体基因转化
15.1 发根农杆菌的生物学特性
15.2 Ri质粒的基因结构与功能
15.3 发根农杆菌基因转化策略
15.4 发根农杆菌基因转化的方法及操作
15.5 Ri质粒基因转化的影响因素
15.6 发根农杆菌转化的应用
复习题
第16章 植物病毒载体介导基因转化
16.1 植物病毒的生物学特性
16.2 双链DNA病毒转化载体
16.3 植物单链RNA病毒的基因转化载体
16.4 逆转录病毒基因转化载体
16.5 植物病毒作为基因转化载体的应用潜力和策略
复习题
第17章 DNA直接导入基因转化及原理
17.1 化学诱导DNA直接转化
17.2 物理法诱导DNA直接转化
复习题
第18章 种质系统介导基因转化
18.1 花粉管通道法介导基因转化
18.2 生殖细胞浸泡法介导基因转化
18.3 胚囊、子房注射法介导基因转化
复习题
第四篇 转基因植物的检测及其原理
第19章 报道基因的表达检测及其原理
19.1 绿色荧光蛋白基因gfp的检测
19.2 β-葡萄糖苷酸酶基因gus的检测
19.3 氯霉素乙酰转移酶基因cat的检测
19.4 冠瘿碱合成酶基因的检测
19.5 萤光素酶基因的检测
19.6 npt-Ⅱ基因的检测
19.7 pat基因的检测
19.8 二氢叶酸还原酶基因的检测
复习题
第20章 外源基因整合的Southern杂交鉴定及原理
20.1 分子杂交概述
20.2 Southern杂交
复习题
第21章 外源基因转录的Northern杂交检测及原理
21.1 植物RNA提取
21.2 探针制备
21.3 Northern斑点杂交
21.4 Northern印迹杂交
复习题
第22章 外源基因表达蛋白的检测及原理
22.1 ELISA检测
22.2 Western杂交
22.3 表达蛋白的含量测定
复习题
第23章 外源基因整合及表达的原位杂交检测及原理
23.1 染色体DNA原位杂交
23.2 组织细胞mRNA原位杂交
23.3 外源基因表达蛋白的组织细胞免疫定位
23.4 组织印迹的Northern及Western杂交
复习题
第24章 转基因植物的PCR检测及原理
24.1 外源基因整合的PCR-Southern杂交检测
24.2 外源基因拷贝数的IPCR检测
24.3 外源基因表达的RT-PCR检测
复习题
第25章 外源基因整合及表达的RFLP、RAPD及生物芯片分析
25.1 外源基因整合的RFLP分析原理
25.2 外源基因整合的RAPD分析原理
25.3 外源基因整合位点的遗传学分析
25.4 生物芯片技术在转基因植物检测中的应用
复习题
第五篇 转基因植物的遗传特性及安全性
第26章 转基因植物中外源DNA的整合特性
26.1 外源DNA的整合位点和拷贝数
26.2 外源DNA结构对整合的影响
26.3 转化后整合位点的DNA结构变化
26.4 转化方法对整合外源基因结构的影响
26.5 位点特异性重组
复习题
第27章 转基因植物中外源DNA整合的遗传效应
27.1 位置效应
27.2 重组效应
27.3 转基因沉默
27.4 克服转基因沉默的策略
复习题
第28章 转基因植物中外源基因的遗传特性
28.1 外源基因在转化植物中的遗传传递规律
28.2 转基因的遗传稳定性
28.3 外界环境对转基因遗传特性的影响
28.4 不同转化方法获得的转基因植株的遗传特性比较
复习题
第29章 转化外源基因的瞬时表达和遗传性表达
29.1 转化外源基因的瞬时表达
29.2 转化外源基因的稳定表达
29.3 外源基因的同源性和异源性表达
复习题
第30章 转基因植物的安全性
30.1 转基因植物安全性的概述
30.2 转基因植物的食品安全性
30.3 转基因植物的环境安全性
复习题
第六篇 植物基因工程实验技术篇
第一部分 核酸分离提取技术
实验1-1 大肠杆菌质粒DNA提取
实验1-2 大肠杆菌质粒DNA纯化
实验1-3 农杆菌Ti质粒DNA提取
实验1-4 农杆菌双元载体中mini-Ti质粒提取
实验1-5 M13噬菌体DNA提取
实验1-6 植物总DNA提取
实验1-7 植物核DNA提取
实验1-8 植物细胞器DNA提取
实验1-9 植物总RNA提取
实验1-10 总RNA中mRNA的分离
实验1-11 核酸提取物纯度及浓度检测3
第二部分 载体构建及DNA重组技术
实验2-1 cDNA合成
实验2-2 目的基因的PCR扩增
实验2-3 目的基因与载体的限制酶酶切及连接
实验2-4 重组质粒DNA转化大肠杆菌
实验2-5 重组质粒DNA的检测
实验2-6 中间表达载体构建
实验2-7 中间载体直接导入农杆菌
实验2-8 三亲交配法将中间载体导入农杆菌
实验2-9 菌落原位杂交
第三部分 分离克隆目的基因技术
实验3-1 mRNA差别显示(DDRT-PCR)
实验3-2 cDNA文库构建
实验3-3 YAC文库构建
实验3-4 BAC文库构建
实验3-5 TAC文库构建
实验3-6 酵母双杂交系统分离克隆目的基因
第四部分 目的基因转化技术
实验4-1 整体植株及组织器官接种根癌农杆菌诱发冠瘿瘤
实验4-2 冠瘿瘤的离体培养及植株再生
实验4-3 农杆菌叶盘法转化
实验4-4 植物悬浮细胞与农杆菌共培养转化
实验4-5 植物原生质体与农杆菌共培养转化
实验4-6 发根农杆菌整体植株接种及离体器官共培养诱发毛状根
实验4-7 毛状根的离体培养及植株再生
实验4-8 发根农杆菌介导的目的基因转化
实验4-9 病毒介导外源基因转化
实验4-10 基因枪转化外源基因
实验4-11 PEG介导基因转化
实验4-12 电激诱导基因转化
实验4-13 显微注射导入外源基因
实验4-14 激光转化外源基因
实验4-15 超声波转化外源基因
实验4-16 脂质体转化外源基因
实验4-17 花粉粒媒体介导外源基因转化
实验4-18 子房注射导入外源基因
实验4-19 穗鞘腔浸泡导入外源基因
实验4-20 种子浸泡导入外源基因
第五部分 转基因植物的检测技术
实验5-1 冠瘿碱检测
实验5-2 NPT-Ⅱ活性检测
实验5-3 Gus活性检测
实验5-4 Cat活性检测
实验5-5 Pat活性检测
实验5-6 Dhfr活性检测
实验5-7 萤光素酶活性检测
实验5-8 转基因植物总核酸的提取
实验5-9 转基因植物的Southern印迹杂交鉴定
实验5-10 外源基因整合的PCR-Southern印迹杂交检测
实验5-11 外源基因表达的Northern印迹杂交检测
实验5-12 外源基因表达的RT-PCR检测
实验5-13 外源基因整合的原位杂交
实验5-14 外源基因表达的mRNA原位杂交
实验5-15 外源基因表达的ELISA检测
实验5-16 外源基因表达的Western印迹分析
参考文献