本书包括基因工程中一些最基本的实验方法,例如DNA分析、RNA分析、克隆与亚克隆方法、PCR等,同时也介绍了诸如银染、非放射性标记、自动化DNA序列分析等新技术。本书对于专业科研人员来说可提供较新的技术参考材料,对于生物学、医学、药学等专业的本科生、研究生来说也是一本非常好的实验技术参考书,使读者在学习基因工程常规操作的同时能全面了解当前新技术的进展情况。
样章试读
目录
- 第一部分 DNA分析
第一章 从组织或培养细胞同时分离DNA与RNA
第二章 DNA的限制性内切酶消化
第三章 琼脂糖凝胶电泳
第四章 琼脂糖凝胶电泳的印迹转移
第五章 应用随机引物的32p标记DNA探针的制备
第六章 Southern印迹的杂交和竞争性杂交
第七章 Southern杂交中地高辛修饰的核苷酸标记DNA探针的应用
第八章 荧光素标记核酸探针的制备及其碱性磷酸脂酶催化的二氧杂环烷化学发光反应检测
第九章 监测核酸探针中荧光素标记水平的快速检测
第十章 辣根过氧化物酶标记的核酸探针制备及其强化的化学发光反应检测
第十一章 寡核苷酸3'端的荧光素-11-dUTP标记及其强化的化学发光反应检测
第十二章 RNA探针的制备
第十三章 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
第十四章 核酸的银染检测
第十五章 DNA片段的末端标记
第二部分 RNA分析
第十六章 Northern印迹分析
第十七章 RNA狭缝印迹分析-
第十八章 RNase保护测定法
第十九章 mRNA的引物延伸分析
第二十章 应用单链DNA探针的S1定位法
第二十一章 细胞及组织的非放射性原位杂交
第三部分 基因克隆技术
第二十二章 DNA的体外包装
第二十三章 应用人置换型载体构建哺乳动物基因组文库
第二十四章 用于构建文库的双链cDNA制备
第二十五章 cDNA文库的构建
第二十六章 人文库的筛选
第四部 分亚克隆方法
第二十七章 亚克隆的策略与方法
第二十八章 应用玻璃珠从琼脂糖凝胶中纯化DNA片段
第二十九章 大肠杆菌的转化
第三十章 细菌的电击穿孔转化
第三十一章 应用碱裂解法制备质粒DNA
第三十二章 应用快速煮沸法制备小量质粒DNA
第三十三章 应用硅藻土制备质粒DNA
第五部分 PCR技术
第三十四章 聚合酶链式反应:基本方法
第三十五章反向聚合酶链式反应
第三十六章 应用以简并寡核背酸为引物的PCR技术克隆基因家族成员
第三十七章 应用T-载体克隆PCR产物
第三十八章 PCR产物的直接放射性标记
第三十九章 应用PCR技术快速筛选含克隆片段的菌落
第四十章 应用PCR技术筛选噬菌体文库
第六部分 DNA序列测定
第四十一章 应用M13噬菌体作为载体克隆DNA片段
第四十二章 应用外切核酸酶Ⅲ制备有序缺失系列
第四十三章 M13噬菌体生长和单链DNA制备
第四十四章 从噬粒载体制备ssDNA
第四十五章 用于双脱氧测序的快速质粒纯化法
第四十六章 应用测序酶Version2.0T7DNA聚合酶进行DNA测序
第四十七章 线性和梯度缓冲液测序胶的灌注
第四十八章 测序反应样品的电泳
第四十九章 PCR产物的直接测序
第五十章 应用热循环-双脱氧法进行DNA测序
第五十一章自动DNA测序仪的使用
第五十二章 用于Maxam-GilbertDNA测序法中的DNA末端标记
第五十三章 DNA的化学测序
第七部分 定点诱变与蛋白质合成
第五十四章 双链质粒的定点诱变、结构城置换以及标记获救
第五十五章 应用含尿嘧啶的噬粒为模板的定点诱变法
第五十六章 无细胞系统中的mRNA翻译-兔网织红细胞裂解液
第五十七章 无细胞系统中的mRNA翻译-麦胚提取物
第五十八章 应用6xHis标签和Ni-NTA树脂对重组蛋白进行一步纯化