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本书是王金发教授主持的《细胞生物学》立体化教材建设项目的实验教材。全书包括12章共64个实验,涵盖了部分经典的细胞生物学实验,又新增了一些与现代细胞生物学和分子生物学相关的新技术,内容包括光学显微镜技术、电子显微镜技术、细胞的形态结构、细胞化学、细胞生理、细胞分裂与染色体畸变、染色体技术与核型分析、细胞和组织培养技术、细胞化学成分的分离、蛋白质及核酸的定位与检测、细胞工程技术以及流式细胞技术、共聚焦显微技术、细胞凋亡检测技术等。
本书可供综合性大学、农林、医学、师范院校本科生和研究生的细胞生物学实验课教学使用,也可作为相关研究人员的参考用书,由于本书实验内容较多,在使用时可根据自身条件酌情选择。
目录
- 第一章 光学显微镜技术
实验1普通光学显微镜的构造原理及使用方法
实验2特殊显微镜的原理和使用
实验3显微摄影技术
实验4光学显微标本的制作技术
第二章 电子显微镜技术
实验5透射电子显微镜
实验6透射电子显微镜样品制备
实验7扫描电子显微镜
实验8扫描电子显微镜样品制备
第三章 细胞的形态结构
实验9细胞形态结构与几种细胞器的观察
实验10液泡系和线粒体的活体染色
实验11植物细胞骨架的光学显微镜观察
实验12细胞骨架的免疫荧光显示
实验13细胞的超微结构
实验14细胞的显微测量
第四章 细胞化学
实验15DNA的细胞化学——Feulgen反应
实验16RNA的细胞化学——Brachet反应
实验17细胞中多糖和过氧化物酶的定位
实验18细胞中酸性磷酸酶的定位
实验19细胞中碱性磷酸酶的定位
第五章 细胞生理
实验20小鼠巨噬细胞吞噬的观察
实验21胞饮作用
实验22细胞膜的通透性
实验23细胞电泳
第六章 细胞分裂与染色体畸变
实验24细胞的无丝分裂与有丝分裂
实验25细胞减数分裂
实验26环境因素及辐射诱变染色体改组的观察
第七章 染色体技术与核型分析
实验27植物染色体标本的制备和观察
实验28动物骨髓细胞染色体标本的制备
实验29人体外周血淋巴细胞培养与染色体标本制备
实验30人类染色体G带技术
实验31植物染色体分带技术
实验32人类体细胞染色体组型分析
实验33染色体核仁组织区(NOR)的显示
实验34姊妹染色单体色差分析技术
第八章 细胞和组织培养技术
实验35植物组织培养技术
实验36原生质体的分离和培养
实验37植物体细胞杂交——原生质体的融合
实验38动物细胞原代培养
实验39传代细胞培养
实验40细胞的冻存与复苏
实验41哺乳动物胚胎干细胞的培养和体外分化
第九章细胞化学成分的分离
实验42细胞核与线粒体的分级分离
实验43完整叶绿体的分离
实验44中期染色体的分离纯化
实验45动物细胞基因组DNA的提取
实验46植物基因组DNA的提取
实验47细胞和组织总RNA的提取
实验48琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段
第十章 蛋白质、核酸的定位与检测
实验49地高辛标记探针的Southern 杂交
实验50放射性标记探针的Northern杂交
实验51Western 印迹法(蛋白质印迹法)
实验52蛋白质与蛋白质相互作用检测——酵母双杂交筛选
实验53原位PCR
实验54用ABC法进行蛋白质的免疫定位
第十一章 细胞工程技术
实验55鸡血细胞的体外融合
实验56磷酸钙沉淀法将DNA导入细胞
实验57电穿孔和电融合技术
实验58反转录病毒载体介导的基因转导
实验59细胞显微注射技术
第十二章 其他技术
实验60细胞放射自显影
实验61流式细胞技术
实验62荧光标记技术
实验63细胞凋亡的检测
实验64共聚焦显微技术及去旋技术
主要参考文献
附录
附录1 一些常用的换算
附录2 常用试剂及溶液的配制和使用
附录3 光学仪器保养与清洁的要点
附录4 常用缩写汇编
附录5 常用细菌培养基的配方