本书被评为“十二五”普通高等教育本科国家级规划教材,是王金发教授主持编写的《细胞生物学》配套实验教材,是在2004年出版的《细胞生物学实验教程》基础上重新修订的。全书包括12章共71个实验,内容既保留了目前在细胞生物学研究领域中经常用到的经典实验,又新增了不少与现代细胞生物学和分子生物学相关的新技术,包括:线粒体膜电位检测,抗性膜和胆固醇去除,细胞电泳技术,DNA、RNA和蛋白质的原位杂交,差异基因表达,酵母中CDNA的表达,细胞凋亡检测,果蝇胚胎的共聚焦显微技术等。
样章试读
目录
- 目目录
第二版前言
第一版前言
第一章 光学显微镜技术 1
实验1 普通光学显微镜的构造原理及使用方法 1
实验2 特殊显微镜的原理和使用 7
实验3 光学显微标本的制作技术 12
第二章 电子显微镜技术 21
实验4 透射电子显微镜 21
实验5 透射电子显微镜样品制备 24
实验6 扫描电子显微镜 28
实验7 扫描电子显微镜样品制备 30
第三章 细胞的形态结构 33
实验8 细胞形态结构与几种细胞器的观察 33
实验9 液泡系和线粒体的活体染色 34
实验10 用荧光脂质进行细胞活体染色 37
实验11 植物细胞骨架的光学显微镜观察 41
实验12 细胞骨架的免疫荧光显示 43
实验13 细胞的超微结构 46
实验14 细胞的显微测量 50
第四章 细胞化学 53
实验15 DNA的细胞化学——Feulgen反应 53
实验16 RNA的细胞化学——Brachet反应 55
实验17 细胞中多糖和过氧化物酶的定位 56
实验18 细胞中酸性磷酸酶的定位 58
实验19 细胞中碱性磷酸酶的定位 60
第五章 细胞生理 62
实验20 小鼠巨噬细胞吞噬的观察 62
实验21 胞饮作用 63
实验22 细胞膜的通透性 64
实验23 核质穿梭测定法 66
实验24 线粒体膜电位检测 72
实验25 细胞电泳 73
第六章 细胞分裂与染色体畸变 79
实验26 细胞的无丝分裂与有丝分裂 79
实验27 细胞减数分裂 81
实验28 环境因素及辐射诱变染色体改组的观察 86
实验29 细胞毒和细胞生长测定 88
实验30 彗星测定 93
第七章 染色体技术与核型分析 96
实验31 植物染色体标本的制备和观察 96
实验32 动物骨髓细胞染色体标本的制备 98
实验33 人体外周血淋巴细胞培养与染色体标本制备 100
实验34 人类染色体G带技术 103
实验35 植物染色体分带技术 105
实验36 人类体细胞染色体组型分析 107
实验37 染色体核仁组织区(NOR)的显示 109
实验38 姐妹染色单体色差分析技术 111
第八章 细胞和组织培养技术 114
实验39 植物组织培养技术 114
实验40 原生质体的分离和培养 117
实验41 细胞计数 120
实验42 动物细胞原代培养 121
实验43 果蝇胚胎细胞的原代培养 123
实验44 传代细胞培养 126
实验45 细胞的冻存与复苏 128
第九章 细胞化学成分的分离 130
实验46 细胞核与线粒体的分级分离 130
实验47 高尔基体的分离 132
实验48 核仁的分离 138
实验49 过氧化物体的分离 143
实验50 完整叶绿体的分离 149
实验51 中期染色体的分离纯化 151
实验52 动物细胞基因组DNA的提取 154
实验53 植物基因组DNA的提取 156
实验54 细胞和组织总RNA的提取 157
第十章 蛋白质、核酸的定位与检测 159
实验55 琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段 159
实验56 同步检测DNA、RNA和蛋白质的原位杂交技术 161
实验57 银染法检测凝胶中的蛋白质——改良硝酸银染法 168
实验58 染色质免疫共沉淀 170
实验59 代表性差异分析:研究差异基因表达的方法 175
实验60 酵母中cDNA表达 182
第十一章 细胞工程技术 189
实验61 细胞融合 189
实验62 植物体细胞杂交——原生质体的融合 191
实验63 单克隆抗体的制备 193
实验64 产细胞克隆测定 200
实验65 去污剂抗性膜和胆固醇去除的应用 202
第十二章 其他技术 208
实验66 细胞放射自显影 208
实验67 流式细胞技术 210
实验68 荧光标记技术 216
实验69 细胞凋亡的检测 218
实验70 共聚焦显微技术及去旋技术 223
实验71 果蝇胚胎的共聚焦显微技术 235
参考文献 242
附录 246
附录1 一些常用的换算 246
附录2 常用试剂及溶液的配制和使用 246
附录3 光学仪器保养与清洁的要点 251
附录4 常用缩写汇编 252
附录5 常用细菌培养基的配方 254