本教材是为了适应医学教育改革、培养高素质创新型医学人才的需要而编写的一本生物化学与分子生物学实验教材。本书分为三部分:第一部分介绍了生物化学与分子生物学实验基本知识与理论,包括生物化学与分子生物学实验基本知识、生物化学实验基本技术理论、分子生物学实验基本技术理论、生物化学与分子生物学专业常用数据库及其应用;第二部分为生物化学与分子生物学实验操作,共精选了30个生物化学与分子生物学具体实验;第三部分为附录,列出了常用生物化学与分子生物学试剂的配制方法。
本教材既可作为医学院校各专业学生(包括研究生)的教学用书,也可作为相关专业教师和科技工作者的科研参考用书。
样章试读
目录
- 第一篇 生物化学与分子生物学实验基本知识与理论
第一部分 生物化学与分子生物学实验基本知识
一、实验室基本规则
二、实验室基本操作
三、实验样品的制备
四、实验误差与数据处理
五、实验记录与实验报告
第二部分 生物化学实验基本技术理论
一、分光光度技术
二、层析技术
三、电泳技术
四、离心技术
第三部分 分子生物学实验基本技术理论
一、重组DNA技术
二、核酸分子杂交技术
三、聚合酶链反应技术
四、蛋白质印迹技术
第四部分 生物化学与分子生物学专业常用数据库及其应用
一、常用数据库
二、常用分析工具
三、真核基因启动子区生物信息学分析
四、MicroRNA靶标的预测
第二篇 生物化学与分子生物学实验操作
第五部分 生物化学实验操作
实验一 蛋白质的性质
实验二 蛋白质含量测定
实验三 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白
实验四 SDS-PAGE蛋白电泳
实验五 蛋白质双向电泳
实验六 氨基酸与蛋白质层析
实验七 肽或蛋白质N-端氨基酸残基序列测定
实验八 核酸的分离提取、鉴定及含量测定
实验九 双脱氧链末端合成终止法测定DNA序列
实验十 酶反应条件的选择
实验十一 酶活性测定
实验十二 酶反应速度与米氏常数测定
实验十三 血糖(葡萄糖)测定
实验十四 脂类测定
实验十五 代谢产物测定
第六部分 分子生物学实验操作
实验十六 质粒DNA的提取、酶切及电泳
实验十七 DNA片段的回收、连接与转化
实验十八 重组子的转化与筛选
实验十九 重组DNA在原核细胞中的表达
实验二十 常规PCR及RT-PCR
实验二十一 实时定量PCR(real-time PCR)
实验二十二 DNA的分子杂交——Southern印迹
实验二十三 RNA的分子杂交——Northern印迹
实验二十四 蛋白质的免疫印迹——Western印迹
实验二十五 cDNA文库的构建
实验二十六 荧光素酶报告基因检测启动子活性
实验二十七 电泳迁移阻滞实验
实验二十八 染色质免疫沉淀实验
实验二十九 酵母双杂交实验
实验三十 RNA干扰实验
附录
附录1 化学试剂分级与注意事项
附录2 常用缓冲液的配制
附录3 硫酸铵饱和度计算表
附录4 常用培养基及抗生素的配制
附录5 离心机转速(r/min)与相对离心力(RCF)的换算