本书为中国科学院教材建设专家委员会规划教材《生物化学与分子生物学》的配套教材,内容包括总论,介绍生物化学的基本操作技术,当前生物化学与分子生物学研究常用的电泳、层析、离心分离、印迹技术和聚合酶链式反应等实验技术的原理、种类、应用和前沿。各论共有40个实验,其中蛋白质与核酸、酶学、糖、脂和生物氧化部分的实验是比较成熟的生物化学基本实验;核酸部分的实验主要是分子生物学常用技术的实验,是近几年在研究生实验课中开设并有部分实验选用到本科生实验教学中的;最后部分有8个综合性实验,在基本技能训练的基础上,对学生进行实验设计和科研入门训练。本书语言简练,实用性强。不仅适合医学院校5年制、7年制本科生使用,也适合相关人员参考。
样章试读
目录
- 第1篇 总 论
实验须知
第1章 基本操作技术
第1节 玻璃器皿的清洗
第2节 吸量管的种类和使用
第3节 溶液的混匀、过滤及离心
第4节 实验样品的制备
第5节 分光光度法
第2章 电泳技术
第1节 电泳的基本原理
第2节 影响电泳的主要因素
第3节 区带电泳的分类
第4节 几种常见的电泳方法
第5节 二维电泳
第3章 层析技术
第1节 层析技术的分类
第2节 层析中的常用术语
第3节 纸层析
第4节 薄层层析
第5节 离子交换层析
第6节 凝胶层析
第7节 亲和层析
第4章 离心分离技术
第1节 离心分离技术的原理
第2节 离心机的分类与特点
第5章 印迹技术
第1节 Southern印迹
第2节 Northern印迹
第3节 斑点杂交
第4节 Western印迹
第6章 聚合酶链式反应
第1节 PCR技术概述
第2节 PCR技术的基本原理
第3节 PCR反应条件的优化
第4节 PCR技术的扩展
第5节 PCR中应注意的问题
第6节 PCR在医学中的应用
第2篇 各 论
第7章 蛋白质与氨基酸
实验1 蛋白质含量的测定
实验2 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳定量测定
实验3 凝胶层析法分离血红蛋白和DNP-鱼精蛋白(或DNP-酪蛋白)
实验4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量
实验5 蛋白质的沉淀反应
实验6 酪蛋白等电点的测定
实验7 氨基酸的薄层层析
实验8 DNS-氨基酸聚酰胺薄膜双向层析
第8章 酶学
实验9 影响酶活性的因素
实验10 蔗糖酶的专一性
实验11 丙氨酸转氨酶活性的测定
实验12 乳酸脱氢酶同工酶的分离
实验13 转氨基反应
实验14 琥珀酸脱氢酶的作用及竞争性抑制
实验15 米氏常数的测定
第9章 糖、脂和生物氧化
实验16 饥饿和饱食对肝糖原含量的影响
实验17 脂蛋白的分离和提纯
实验18 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳
实验19 清三酰甘油测定
实验20 高密度脂蛋白中胆固醇含量测定
实验21 血清总胆固醇含量测定
实验22 乳酸测定
实验23 血中葡萄糖含量的测定
第10章 核酸
实验24 细胞核的分离和纯化
实验25 核酸含量的测定
实验26 酵母RNA的提取及组分鉴定
实验27 真核细胞基因组DNA的制备与定量
实验28 质粒DNA的提取、纯化和鉴定
实验29 DNA的限制性酶切反应
实验30 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA分子导入原核细胞
实验31 Southern印迹
实验32 Northern印迹
实验33 PCR扩增技术
实验34 随机扩增多态性DNA技术
第11章 综合性实验
实验35 血清γ-球蛋白的分离及纯度鉴定
实验36 碱性磷酸酶的提取、比活性及Km值的测定
实验37 Western印迹
实验38 RT-PCR
附:RQ-PCR
实验39 细菌双杂交质粒DNA的提取纯化及鉴定
实验40 a poE基因多态性分析
附录
主要参考资料