本书入选普通高等教育“十一五”和“十二五”国家级规划教材,是国家级精品课程配套主干教材。主要介绍细胞工程的理论与技术,内容分为三篇:第一篇介绍细胞工程的技术基础,第二篇介绍动物细胞工程,第三篇介绍植物细胞工程。
本书有两个主要特点:一是内容涵盖动物细胞工程和植物细胞工程;二是理论知识与实验指导密切结合,设置了20个实验。一本教材兼有理论教材与实验教材两种功能,比较实用。
样章试读
目录
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第三版前言
绪论/1
0.1 细胞工程简介/1
0.2 细胞工程的发展史/2
第一篇 细胞工程的技术基础
第1章 细胞培养的设施与基本条件/7
1.1 细胞工程实验室的设置/7
1.1.1 动物细胞工程实验室的设置/7
1.1.2 植物细胞工程实验室的设置/8
1.2 常用仪器与设备/8
1.2.1 动物与植物细胞工程实验室通用的仪器设备/8
1.2.2 动物细胞工程实验室的常用仪器设备/12
1.2.3 植物细胞工程实验室的常用仪器设备/14
1.3 实验室的生物安全/14
第2章 清洗与消毒/16
2.1 清洗/16
2.1.1 玻璃器皿的清洗/16
2.1.2 胶塞的清洗/17
2.1.3 塑料制品的清洗/17
2.1.4 G6除菌滤器的清洗/17
2.1.5 不锈钢除菌滤器的清洗/17
2.1.6 包装/17
2.2 消毒/18
2.2.1 物理灭菌法/18
2.2.2 化学消毒法/19
实验1 器械的清洗与消毒/20
第3章 细胞培养的基本方法/22
3.1 无菌操作技术/22
3.1.1 实验器具和材料的准备/22
3.1.2 培养室和超净台的消毒/22
3.1.3 洗手和着装/23
3.1.4 无菌培养操作/23
3.2 培养细胞的观察/23
3.2.1 相差显微镜观察/24
3.2.2 培养细胞的观察/25
3.3 细胞培养中常用的染色方法/26
3.3.1 活体染色/26
3.3.2 染料排除检测法/26
3.4 细胞培养的污染和检测/27
3.4.1 污染途径/27
3.4.2 污染对培养细胞的影响及检测/28
3.4.3 污染的预防/29
3.4.4 污染的排除/29
第二篇 动物细胞工程
第4章 细胞培养/33
4.1 培养细胞的生物学特征/34
4.1.1 体外培养细胞的分型/34
4.1.2 培养细胞的生长特点/35
4.1.3 培养细胞的生长与增殖过程/35
4.1.4 培养细胞的遗传学特征/37
4.1.5 体内外细胞的差异及培养细胞的分化/37
4.2 细胞培养液/38
4.2.1 细胞培养的常用液体/38
4.2.2 培养基/39
4.3 细胞的基本培养技术/45
4.3.1 原代培养/46
4.3.2 传代培养/49
4.3.3 常用培养技术/50
4.4 细胞系和细胞株的建立/58
4.4.1 细胞系和细胞株的种类/58
4.4.2 建立细胞系(或株)的要求/59
4.4.3 细胞系和细胞株的鉴定/59
4.5 细胞的冻存?复苏和运输/60
4.5.1 细胞的冻存/60
4.5.2 细胞的复苏/60
4.5.3 细胞的运输/60
实验2 细胞培养液的配制/62
实验3 原代细胞培养/63
实验4 培养细胞的增殖及活力测定/65
实验5 细胞的传代培养/67
实验6 细胞的冻存和复苏/68
第5章 细胞融合与单克隆抗体/69
5.1 单克隆抗体技术/70
5.1.1 单克隆抗体技术的原理/70
5.1.2 杂交瘤制备/71
5.1.3 单克隆抗体的大量制备/77
5.2 人源性单克隆抗体制备/78
5.2.1 EB病毒转化技术/78
5.2.2 细胞工程单克隆抗体技术/79
5.2.3 人单抗制备技术的发展/82
5.3 单克隆抗体在医学上的应用/84
5.3.1 单克隆抗体靶向制剂/84
5.3.2 单克隆抗体在肿瘤诊断与治疗中的应用/85
实验7 动物细胞融合/87
第6章 胚胎工程/88
6.1 胚胎发育的基本过程和机制/88
6.1.1 胚胎发育的基本过程/89
6.1.2 胚胎发育的基本机制/93
6.2 体外受精/96
6.2.1 体外受精的研究历史/96
6.2.2 体外受精技术/96
6.3 胚胎移植技术/98
6.3.1 胚胎移植的研究历史/98
6.3.2 胚胎移植技术/99
6.4 胚胎分割技术/100
6.4.1 胚胎分割的方法/101
6.4.2 分割胚的培养/101
6.4.3 胚胎分割目前存在的问题和发展前景/102
6.5 早期胚胎的体外培养/102
6.5.1 胚胎的发育阻滞/102
6.5.2 克服胚胎发育阻滞的方法/103
6.6 胚胎冷冻保存技术/104
6.6.1 抗冻保护剂和冷冻溶液/104
6.6.2 胚胎的冷冻方法/104
6.7 动物的性别控制/105
6.7.1 动物的性别决定/105
6.7.2 性别控制的方法与技术/106
6.7.3 性别控制的意义/109
实验8 哺乳动物体外受精和早期胚胎的体外培养/111
第7章 干细胞与组织工程/113
7.1 胚胎干细胞/114
7.1.1 胚胎干细胞的研究概况/114
7.1.2 胚胎干细胞的生物学特性/114
7.1.3 胚胎干细胞的建系/115
7.1.4 ES细胞的鉴定/116
7.1.5 ES细胞的应用前景及面临的难题/117
7.2 成体干细胞/118
7.2.1 造血干细胞/118
7.2.2 神经干细胞/118
7.2.3 胰岛干细胞/119
7.2.4 皮肤干细胞/119
7.3 组织工程/119
7.3.1 组织工程化皮肤/119
7.3.2 组织工程化骨骼/120
7.3.3 组织工程化血管/120
7.3.4 组织工程化管状器官/120
7.3.5 组织工程化腺体器官/120
第8章 核移植技术与动物克隆/122
8.1 核移植技术/122
8.1.1 核移植技术的类型/122
8.1.2 核移植技术的一般操作程序/123
8.2 核移植技术的应用/124
8.2.1 核移植技术的应用/124
8.2.2 核移植技术存在的问题/125
实验9 鱼类核移植实验/126
实验10 哺乳类细胞核移植实验/127
第9章 转基因动物与动物生物反应器/128
9.1 转基因动物的培育技术/128
9.1.1 基因显微注射法/129
9.1.2 逆转录病毒感染法/129
9.1.3 胚胎干细胞介导法/130
9.1.4 精子载体导入法/130
9.1.5 YAC介导的基因转移/130
9.1.6 转基因细胞核移植技术/131
9.2 转基因动物的应用/131
9.2.1 改良动物品种/131
9.2.2 生物制药/131
9.2.3 建立诊断和治疗人类疾病的动物模型/131
9.2.4 生产可用于人体器官移植的动物器官/132
9.2.5 基因治疗/132
9.2.6 基因打靶/133
9.2.7 转基因动物应用面临的问题/133
9.3 动物乳腺生物反应器/134
9.3.1 动物乳腺生物反应器的制备/134
9.3.2 动物乳腺生物反应器的优点/135
9.3.3 动物乳腺生物反应器的应用/135
9.3.4 动物乳腺生物反应器存在的问题/136
实验11 磷酸钙沉淀法转染细胞/138
实验12 电穿孔和电融合技术/139
第10章 动物染色体工程/141
10.1 动物染色体倍性改造/141
10.1.1 动物的多倍体育种/141
10.1.2 动物的单倍体育种/144
10.2 动物染色体结构的改造/145
10.2.1 染色体片段的删除和重排/145
10.2.2 染色体的易位工程/146
10.3 人工染色体/146
10.3.1 酵母人工染色体/146
10.3.2 细菌人工染色体/147
10.3.3 哺乳类人工染色体/147
10.3.4 人工染色体的应用/147
推荐网址/149
第三篇 植物细胞工程
第11章 植物组织培养/153
11.1 植物组织培养的理论基础/154
11.1.1 植物的无性繁殖/154
11.1.2 植物细胞全能性理论/154
11.1.3 植物细胞的脱分化和再分化/154
11.2 植物组织培养/156
11.2.1 实验材料的清洗和消毒/157
11.2.2 培养基/158
11.2.3 接种/163
11.2.4 种质保存/163
11.2.5 植物细胞的大规模培养技术/165
实验13 植物组织培养培养基的配制/169
实验14 植物细胞的悬浮培养及其次生代谢产物的生产/171
实验15 植物叶片的脱分化和再分化培养/173
第12章 植物的快速繁殖/174
12.1 植物快速无性繁殖/174
12.2 植物脱毒/175
12.3 植物快速繁殖和试管苗工厂化生产中的注意事项/176
实验16 月季快繁/178
第13章 体外单倍体诱导与单倍体育种/179
13.1 植物小孢子发育过程/179
13.2 花药和花粉培养/180
13.2.1 花药培养/180
13.2.2 花粉培养/180
13.2.3 小孢子母细胞培养/181
13.3 花药与花粉培养方法/182
13.3.1 材料的选择/182
13.3.2 材料的预处理/183
13.3.3 培养基/184
13.3.4 接种与再生植株的培育/185
13.4 单倍体育种在生产实践中的应用/186
第14章 植物胚胎培养/188
14.1 胚培养/188
14.1.1 成熟胚培养/188
14.1.2 幼胚培养/188
14.1.3 胚培养的意义/189
14.2 子房培养/190
14.3 被子植物胚乳培养/191
14.3.1 植物胚乳的发育特性/191
14.3.2 影响胚乳培养的因素/191
14.3.3 胚乳培养的意义/191
实验17 植物幼胚培养/192
实验18 玉米成熟胚的培养/193
第15章 体细胞胚胎发生和人工种子/194
15.1 愈伤组织与体细胞胚胎发生/194
15.1.1 愈伤组织的诱导/194
15.1.2 愈伤组织器官的发生/195
15.2 人工种子/195
15.2.1 人工种子的制备/196
15.2.2 人工种子的研究现状/198
第16章 植物原生质体融合技术/199
16.1 植物原生质体的制备/199
16.1.1 植物原生质体的分离/199
16.1.2 影响植物原生质体数量和活力的因素/200
16.1.3 植物原生质体的纯化/200
16.1.4 植物原生质体的培养方法/201
16.2 植物原生质体的融合/201
16.2.1 植物原生质体的融合技术/201
16.2.2 融合体/202
16.3 杂种细胞的筛选/203
16.3.1 遗传互补选择法/203
16.3.2 可见标记法/203
16.4 体细胞杂种的鉴定/203
16.5 体细胞融合的意义/204
实验19 植物体细胞原生质体的制备及融合/205
第17章 植物染色体工程/207
17.1 植物染色体倍性改造/207
17.1.1 染色体加倍技术/207
17.1.2 植物的多倍体育种/209
17.1.3 植物的单倍体育种/211
17.2 植物染色体非整倍体改造/213
17.2.1 染色体的削减/213
17.2.2 染色体的添加/214
第18章 植物转基因技术/216
18.1 植物基因转化技术/217
18.1.1 农杆菌介导转化法/217
18.1.2 基因枪介导转化法/218
18.2 转基因植物/219
18.2.1 植物抗虫基因工程/220
18.2.2 植物抗病基因工程/220
18.2.3 植物抗逆基因工程/220
18.2.4 植物品质改良的基因工程/220
18.2.5 植物叶绿体基因工程/220
18.2.6 植物生物反应器/220
实验20 土壤农杆菌的转化实验/222
推荐网址/223
参考文献/224
附录/229
英文专业名词索引/234