本教材精选部分常用生物化学实验,涵盖生物化学实验技术的各个方面,以定量实验为主,特别注重医学生物化学技术的基本原理、临床应用,另外还增加了一些分子生物学的实验方法。本书内容分为三部分:生物化学实验室的基本要求、常用的基本生物化学技术和学生实验项目。通过这些实验的全过程训练,学生能够从多方面对这些生化技术有比较全面的认识,理解这些技术的意义及用途。
样章试读
目录
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第一篇生物化学与分子生物学实验基本要求
第一章实验室安全规则1
第一节实验规则1
第二节实验室安全和注意事项2
第三节应急处理2
第二章实验设计与实验报告4
第一节实验设计4
第二节实验记录及实验报告5
第三节实验误差6
第四节有效数字8
第三章实验化学试剂9
第四章实验室的基本操作13
第一节玻璃器皿的洗涤13
第二节溶液的常规操作16
第三节实验常用标本的制备17
第四节常用实验器材的使用20
第二篇实验室常用基本技术
第五章离心技术24
第六章分光光度技术27
第七章层析技术30
第一节吸附层析30
第二节分配层析30
第三节离子交换层析31
第四节凝胶层析32
第五节亲和层析33
第八章电泳技术36
第一节概述36
第二节醋酸纤维薄膜电泳38
第三节SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳39
第四节琼脂糖凝胶电泳42
第五节其他电泳44
第六节电泳后大分子的检测44
第九章聚合酶链式反应(PCR技术)46
第一节聚合酶链式反应46
第二节反转录PCR(RT-PCR)48
第三节实时荧光定量PCR49
第四节原位RCR52
第五节PCR扩增产物分析53
第十章生物大分子的制备54
第一节生物大分子制备的前处理54
第二节生物大分子的提取55
第三节生物大分子的分离和纯化57
第四节冰冻干燥59
第十一章AC9000型电解质分析仪使用62
第十二章DS-3C微量元素检测仪的使用65
第三篇生物化学与分子生物学实验项目
第十三章蛋白定量测定72
第一节酚试剂法(改良Lowry)72
第二节紫外分光光度法74
第三节改良微量凯氏定氮法75
第十四章蛋白醋酸纤维薄膜电泳77
第十五章SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量80
第十六章乳酸脱氢酶同工酶测定85
第十七章影响酶促反应速率的因素87
第一节pH和温度对酶促反应的影响87
第二节激活剂和抑制剂对酶促反应的影响88
第十八章碱性磷酸酶米氏常数的测定90
第十九章血清/尿淀粉酶测定93
第一节改良Winslow氏法93
第二节碘-淀粉比色法94
第二十章血糖测定96
第一节邻甲苯胺法96
第二节葡萄糖氧化酶法97
第三节尿糖的定性测定(班氏试剂法)99
第二十一章血脂测定100
第一节总胆固醇测定100
第二节甘油三酯测定102
第三节高密度脂蛋白测定(磷钨酸-镁沉淀法)106
第四节血清载脂蛋白的测定107
第二十二章超速离心法分离血浆脂蛋白110
第二十三章肝/尿中酮体的测定112
第一节肝中酮体的测定112
第二节尿中酮体的定性测定 (Lange法)113
第二十四章血清转氨酶测定115
第一节血清丙氨酸氨基转移酶测定115
第二节血清AST测定(赖氏法)120
第二十五章血清尿素氮测定(二乙酰一肟法)122
第二十六章血清胆红素测定124
第一节改良J-G法124
第二节胆红素氧化酶法125
第二十七章提取基因组DNA(蛋白酶K消化法)129
第二十八章提取人外周血基因组DNA(改良碘化钾法)131
第二十九章PCR扩增血液胆固醇酯转运蛋白D442G133
第三十章DNA的琼脂糖凝胶电泳135
第三十一章快速质粒抽提及酶切鉴定138
参考文献141