生命是一个复杂的过程,“DNA-RNA-蛋白质”这一中心法则不能解释所有生命现象。表观遗传学是在这些例外的基础之上发展而成的,是基于非基因序列改变所致基因表达水平变化,如DNA甲基化和染色质重塑等。表观遗传学已经部分颠覆了我们对生物结构和行为方式的理解。本书共分为七篇,主要内容涵盖DNA甲基化、组蛋自修饰、miRNA调控研究前沿和实验技术。在主要阐述了表观遗传学的基本知识的基础上,结合本领域国内外最新科研成果,系统总结介绍了当前表观遗传学领域的前沿进展和最新研究方法。
样章试读
目录
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第一篇表观遗传学概述及分析方法
第一章表观遗传学概述1
第二章DNA甲基化分析方法8
第三章组蛋白修饰分析方法15
第四章非编码RNA相关分析方法19
第二篇基因表达检测
第五章基因表达检测概述26
第六章基因表达检测方法27
第一节RT-PCR技术27
第二节荧光定量PCR技术29
第三节原位杂交技术35
第四节定点突变技术41
第五节基因芯片43
第六节启动子区活性分析50
第三篇miRNA检测技术
第七章miRNA概述52
第八章miRNA检测技术概述56
第一节生物信息学56
第二节miRNA芯片技术59
第三节荧光定量PCR技术检测miRNA62
第四节荧光素酶活性检测技术68
第九章miRNA分析的应用70
第四篇蛋白质检测技术
第十章蛋白检测概述82
第十一章蛋白检测技术概要87
第一节蛋白芯片技术87
第二节蛋白印迹技术91
第三节免疫荧光技术95
第四节免疫组化技术100
第五节ELISA技术103
第六节激光共聚焦技术115
第五篇DNA甲基化与组蛋白修饰检测
第十二章DNA甲基化与组蛋白修饰概述119
第十三章DNA甲基化与组蛋白修饰方法概述136
第一节生物信息学分析136
第二节DNA甲基化检测——MSP法138
第三节DNA甲基化检测——焦磷酸测序法141
第四节DNA甲基化检测——DNA甲基化芯片技术145
第五节DNA甲基化检测——质谱技术147
第六节组蛋白甲基化检测150
第七节组蛋白乙酰化检测155
第八节组蛋白糖基化检测158
第九节组蛋白泛素化检测162
第十节组蛋白甲基化和组蛋白乙酰化位点特异性分析163
第六篇基因与蛋白相互作用检测
第十四章基因与蛋白相互作用检测概述166
第十五章基因与蛋白相互作用检测方法概述167
第一节生物信息学时代167
第二节ChIP技术172
第三节DNaseⅠ足迹实验180
第四节甲基化干扰试验181
第五节电泳迁移率变动实验182
第六节Southern印迹杂交185
第七节表面等离子共振189
第八节酵母单杂交系统194
第九节噬菌体展示技术198
第十节核酸适体技术207
第十一节拉下实验219
第七篇蛋白质与蛋白质相互作用
第十六章蛋白与蛋白相互作用概述221
第十七章蛋白与蛋白相互作用检测方法概述229
第一节生物信息学软件预测237
第二节染色质免疫共沉淀242
第三节印迹叠加或Far-Western印迹245
第四节GST融合蛋白纯化技术245
第五节羟基蛋白质足迹法249
第六节细菌双杂交系统252
第七节酵母双杂交技术255
第十八章蛋白质与蛋白质相互作用应用259
参考文献260