本教材精选部分常用生物化学实验,涵盖生物化学实验技术的各个方面,以定量实验为主,特别注重医学生物化学技术的基本原理、临床应用,另外还增加了一些分子生物学的实验方法。本教材内容分为三部分:生物化学与分子生物学实验基本要求、实验室常用基本技术和生物化学与分子生物学实验项目。通过这些实验的全过程训练,学生能够从多方面对这些生化技术有比较全面的认识,理解这些技术的意义及用途。
样章试读
目录
- 目录
第一篇 生物化学与分子生物学实验基本要求
第一章 实验室安全规则 1
第一节 实验规则 1
第二节 实验室安全和注意事项 2
第三节 应急处理 2
第二章 实验设计与实验报告 4
第一节 实验设计 4
第二节 实验记录及实验报告 5
第三节 实验误差 6
第四节 有效数字 8
第三章 实验化学试剂 9
第四章 实验室的基本操作 13
第一节 玻璃器皿的洗涤 13
第二节 溶液的常规操作 16
第三节 实验常用标本的制备 17
第四节 常用实验器材的使用 20
第二篇 实验室常用基本技术
第五章 离心技术 24
第六章 分光光度技术 28
第七章 层析技术 32
第一节 吸附层析 32
第二节 分配层析 33
第三节 离子交换层析 33
第四节 凝胶过滤层析 34
第五节 亲和层析 35
第八章 电泳技术 38
第一节 概述 38
第二节 醋酸纤维素薄膜电泳 40
第三节 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 42
第四节 琼脂糖凝胶电泳 44
第五节 其他电泳 46
第六节 电泳后大分子的检测 47
第九章 聚合酶链式反应(PCR) 50
第一节 一般聚合酶链式反应 50
第二节 反转录PCR 52
第三节 实时荧光定量PCR 53
第四节 原位PCR 55
第五节 PCR扩增产物分析 56
第十章 生物大分子的制备 58
第一节 生物大分子制备的前处理 58
第二节 生物大分子的提取 60
第三节 生物大分子的分离和纯化 61
第四节 冷冻干燥 63
第十一章 AC9000型电解质分析仪使用 66
第十二章 DS-3C微量元素检测仪的使用 70
第一节 概述 70
第二节 DS-3C微量元素检测仪的使用 70
第十三章 Bio-Rad分子成像系统 79
第一节 Image Lab操作手册 79
第二节 免染总蛋白技术操作和分析指南 88
第三篇 生物化学与分子生物学实验项目
第十四章 蛋白定量测定 91
第一节 酚试剂法(改良Lowry) 91
第二节 紫外分光光度法 93
第三节 改良微量凯氏定氮法 94
第四节 考马斯亮蓝法 95
第五节 双缩脲法 97
第十五章 蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 99
第十六章 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 103
第十七章 凝胶层析法测定蛋白质分子量 108
第十八章 乳酸脱氢酶同工酶测定 111
第十九章 影响酶促反应速率的因素 113
第一节 pH和温度对酶促反应的影响 113
第二节 激活剂和抑制剂对酶促反应的影响 114
第二十章 碱性磷酸酶米氏常数的测定 117
第二十一章 血清/尿淀粉酶测定 121
第一节 改良Winslow氏法 121
第二节 碘-淀粉比色法 122
第二十二章 血糖测定 124
第一节 邻甲苯胺法 124
第二节 葡萄糖氧化酶法 125
第三节 尿糖的定性测定(班氏试剂法) 127
第二十三章 血脂测定 129
第一节 总胆固醇测定 129
第二节 甘油三酯测定 132
第三节 高密度脂蛋白测定(磷钨酸-镁沉淀法) 136
第四节 血清载脂蛋白的测定 137
第二十四章 超速离心法分离血浆脂蛋白 139
第二十五章 肝/尿中酮体的测定 141
第一节 肝中酮体的测定 141
第二节 尿中酮体的定性测定(Lange法) 142
第二十六章 血清氨基转移酶测定 145
第一节 血清谷丙转氨酶测定 145
第二节 血清谷草转氨酶测定(赖氏法) 150
第二十七章 血清尿素氮测定 153
第一节 二乙酰-肟法 153
第二节 脲酶-比色法 154
第三节 酶偶联速率法测定血清尿素 155
第二十八章 血清胆红素测定 157
第一节 改良J-G法 157
第二节 胆红素氧化酶法 159
第二十九章 提取基因组DNA(蛋白酶K消化法) 162
第三十章 提取人外周血基因组DNA 165
第一节 改良碘化钾法 165
第二节 SDS裂解法 166
第三十一章 PCR扩增血液胆固醇酯转运蛋白D442G 168
第三十二章 DNA的琼脂糖凝胶电泳 170
第三十三章 快速质粒抽提及酶切鉴定 173
选择题参考答案 176
参考文献 178