本教材包括文字和数字化资源两大部分内容,填补了国内缺少细胞生物学实验数字化教材的空白。文字部分共分为五章,前三章包含55个有代表性的细胞生物学实验,内容涵盖细胞结构与组成、细胞生理生化、细胞遗传、细胞分化等内容,依据类型、难度、用时等特点,归类为基本型细胞实验、综合型细胞实验和开放探索型细胞实验;后两章分别介绍细胞生物学著名的实验发现和细胞生物学先进仪器设备。数字化资源部分包含了近20个可通过扫描二维码等方式方便地在手机、电脑等终端观看的教学视频,内容主要为相关实验的难点操作和先进实验仪器设备的使用方法。数字化资源让纸质载体的实验教程更加生动、真实地得以展现和拓展,有利于学生自主式学习及提高教学效果。
样章试读
目录
- 目 录
前言
第一章 基本型细胞实验
第一节 细胞的形态、结构观察及组成显示 001
实验1血细胞装片和涂片的制备及染色观察 002
实验2植物细胞的叶绿体、线粒体及液泡观察 005
实验3青蛙或蟾蜍胸骨剑突软骨细胞高尔基体的中性红染色 006
实验4马铃薯和花生徒手切片的制备及细胞内多糖、脂肪的染色 007
实验5 孚尔根法显示细胞中的DNA 009
实验6甲基绿一派洛宁染色法显示细胞中的DNA和RNA 010
实验7考马斯亮蓝染色法显示洋葱鳞茎内表皮及小鼠巨噬细胞的细胞骨架 011
实验8酸性磷酸酶法显示巨噬细胞溶酶体 015
实验9细胞中过氧化物酶体的显示 016
实验10酶免疫细胞化学法显示人工细胞表面CD3分子 018
实验11细胞大小的显微测量 019
第二节 细胞计数 021
实验12常规血细胞计数板计数 021
第三节 细胞生理 023
实验13哺乳动物红细胞膜的通透性检测 023
实验14植物细胞质壁分离现象观察及质壁分离法测定基态渗透值 024
卖验15小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察及吞噬活性检测 026
实验16台盼蓝染料排除法检测活细胞比率 028
第四节 细胞分裂 030
实验17压片法制备植物细胞分裂标本片及分裂各期细胞特征观察 030
实验18滴片法制备动物细胞分裂标本片及细胞分裂指数分析 032
第五节 细胞裂解及效果检测 034
实验19小鼠腹水瘤细胞裂解及乳酸脱氢酶活性检测 035
第六节 细胞器的分离 036
实验20植物细胞叶绿体的分离 037
实验21 动物细胞线粒体的分离 038
第七节 细胞融合 040
实验22 PEG介导的细胞融合实验 041
第二章 综合型细胞实验 043
第一节 细胞的分离与分选 043
实验23密度梯度离心法分离血液单个核细胞 044
实验24免疫磁珠分选法分离小鼠脾脏CD4~ T淋巴细胞 046
实验25 T细胞的免疫荧光标记及流式细胞仪分选实验 048
第二节 细胞培养相关实验 050
实验26贴壁细胞的原代培养实验 051
实验27贴壁细胞的传代培养实验 054
实验28细胞冻存与解冻复苏实验 056
实验29动物外周血细胞培养及染包体制备实验 059
第三节 细胞增殖及细胞活力检测实验 061
实验30 MTT比色法检测细胞增殖与活力 062
实验31 CCK 8法检测细胞增殖与活力 063
第四节 细胞黏附与迁移分析 065
实验32肿瘤细胞黏附能力分析实验 066
实验33 检测肿瘤细胞侵袭能力的Transwell小室实验 067
实验34肿瘤细胞迁移的划痕实验 069
第五节 细胞的激活及信号转导分子检测 070
实验35利用钙离子荧光探针检测细胞内Ca2 J 浓度, 071
实验36信号蛋白磷酸化水平检测实验 073
实验37转录因子NF KB活性检测实验 075
第六节 哺乳动物细胞转基因及表达检测 077
实验38绿色荧光蛋白基因转染体外培养的小鼠成纤维细胞及表达检测 078
第七节 细胞周期调控及检测 080
实验39利用流式细胞术分析细胞周期时相 081
实验40细胞周期蛋白D1基因转染细胞及细胞周期检测 084
实验41 胸腺嘧啶脱氧核苷( TdR)双阻断法同步化培养的动物细胞 086
实验42秋水仙胺阻抑法分离贴壁培养的哺乳动物M期细胞 088
实验43植物细胞中期同步化诱导 089
第三章 开放探索型细胞实验 091
第一节 细胞凋亡及细胞胀亡的诱导及检测 091
实验44凋亡细胞及胀亡细胞的形态学检测 092
实验45 Annexin V FITC/PI双染色法检测凋亡与胀亡细胞 094
实验46凋亡细胞DNA的电泳检测 096
实验47 TUNEL技术原位检测凋亡细胞 098
第二节 细胞白噬的诱导及检测 101
实验48 MDC染色法检测巨噬细胞白噬现象” 102
实验49 GFP LC3墓因转染法显示白噬体 104
第三节 细胞衰老的诱导与检测 105
实验50细胞ROS的流式细胞仪检测 106
实验51 H70.诱导细胞衰老及胞内衰老相关的p一半乳糖苷酶检测 108
第四节 细胞分化的诱导及检测 110
实验52骨髓造血干细胞的诱导分化实验 112
实验53视黄酸诱导肿瘤细胞分化及检测实验 115
第五节 小干扰RNA引起的基因沉默实验 117
实验54 RNA干扰沉默绿色荧光蛋白基因 118
第六节 细胞端粒酶活性检测实验 120
实验55肿瘤细胞的端粒酶活性检测 121
第四章 细胞生物学著名的实验发现 124
一、细胞膜磷脂双层的发现 125
二、线粒体的发现与功能研究 126
三、溶酶体的发现 126
四、高尔基体的发现 127
五、细胞周期调控的发现 127
六、照亮细胞的绿色荧光蛋白 128
七、细胞凋亡与线虫 129
八、蛋白质的地址签 129
第五章 细胞生物学先进仪器设备 131
第一节 细胞观察仪器 131
一、相差显微镜 131
二、透射电子显微镜 132
三、激光扫描共聚焦显微镜 134
四、超高分辨率荧光显微镜 139
五、高内涵细胞成像和分析系统 142
第二节 细胞分选设备 145
一、流式细胞仪 145
二、细胞磁分选仪 148
第三节 细胞破碎设备 150
第四节 细胞切片制作设备 151
第五节 细胞酶活等分析设备 152
附录一本书常用溶液配制方法 155
附录二腹水瘤小鼠模型建立方法 157
附录三细胞培养前的准备工作 158