本书从生物学研究方法和步骤入手,全面覆盖了有关细胞生物学、分子生物学、组学等实验技术的诸多领域,包含了生物活性分子制备和分析常用技术、PCR技术、基因组学技术、蛋白质组学技术等。本书在详细阐述有关技术的具体操作和实验流程的基础上,更注重对各种技术的综合运用。书中每个实验都有实验原理的介绍,实验步骤也着重强调操作的注意事项和实验取得成功的关键。
样章试读
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前言
绪论 001
第一章 生物成分提取及样品制备技术 005
第一节 生物样品制备 005
第二节 DNA的提取 020
第三节 RNA的提取 032
第四节 蛋白质的提取 040
第二章 PCR技术 051
第一节 限制性片段长度多态性 051
第二节 扩增片段长度多态性 052
第三节 普通PCR 054
第四节 RT-PCR(反转录-聚合酶链反应) 057
第五节 RT-qPCR技术 060
第三章 RNA技术 068
第一节 RNA琼脂糖凝胶电泳 068
第二节 RNA印迹法 070
第三节 RNA干扰技术 073
第四章 DNA技术 081
第一节 单核苷酸多态性实验 081
第二节 染色质免疫共沉淀技术 083
第三节 cDNA文库构建 086
第四节 ATAC-seq技术 091
第五章 蛋白质技术 096
第一节 蛋白质印迹技术 096
第二节 免疫组织化学技术 103
第三节 免疫共沉淀技术 112
第六章 流式细胞术 115
第一节 Annexin V 流式细胞技术检测细胞凋亡 115
第二节 凋亡细胞的DNA断裂片段分析 118
第三节 BrdU Flow Kit检测细胞增殖 120
第四节 线粒体膜电位变化检测细胞凋亡 123
第五节 Active Caspase-3检测细胞凋亡 125
第七章 组学分析 127
第一节 16S rDNA基因组分析 127
第二节 宏基因组分析 146
第三节 转录组分析 167
第四节 蛋白质组分析 174
第五节 代谢组分析 185
主要参考文献 194