本教材是《植物生物技术》(第二版)(张献龙主编)的配套实验教材,针对教材中的3个模块:分子标记技术与基因定位、基因克隆与载体构建、植物组织培养与遗传转化,设计综合实验,以达到加强巩固理论知识的目的。通过综合实验锻炼学生大局科研思维和实验技能。
样章试读
目录
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前言
综合实验一 突变体的遗传分析及基因定位 1
实验一 拟南芥种植、生长发育及杂交 2
实验二 rrg短根突变体的观察及遗传分析 6
实验三 植物基因组
DNA的提取(CTAB法)和凝胶检测 10
实验四 Bulk DNA PCR扩增(SSR技术) 16
实验五 Bulk DNA PCR扩增产物的PAGE检测(SSR技术) 21
实验六 拟南芥F2大群体DNA的PAGE检测结果分析 25
实验七 作图与QTL分析软件的使用 28
综合实验二 植物表达载体的构建 35
实验八 细菌培养基及其配制 36
实验九 目标基因引物的设计 38
实验十 目标基因的PCR扩增 42
实验十一 载体的选择和质粒的提取 44
实验十二 质粒载体的酶切及与PCR产物的连接 49
实验十三 重组质粒转化大肠杆菌 53
实验十四 重组子的筛选及鉴定 56
实验十五 重组质粒转化农杆菌 59
综合实验三 植物遗传转化及转基因后代的分子检测 65
实验十六 植物组织培养培养基的制备 66
实验十七 棉花愈伤组织的诱导及形态观察 69
实验十八 根癌农杆菌介导的植物遗传转化 72
实验十九 植物原生质体的分离和纯化 82
实验二十 转基因植株PCR阳性检测 87
实验二十一 转基因植株Southern杂交分析 90
实验二十二 转基因植株RNA提取及检测 95
实验二十三 转基因材料的RT-PCR检测 99
实验二十四 转基因植株Northern 杂交分析 101
实验二十五 植物蛋白质的提取与浓度测定 105
实验二十六 转基因植株Western杂交分析 109
参考文献 113
附录 农杆菌介导水稻遗传转化实验的溶液配方 115