本书编写参照了建设国家级实验教学示范中心要求的实验教学模式,将实验项目分成实验总体要求与实验基本操作、基础训练型实验、综合提高型实验及研究应用型实验四章,分别介绍了27项实验内容。在实验内容的选取上,既考虑到生物化学与分子生物学本身学科的要求,又力求贴近临床医学实践和医学科研相关知识,在深度和难度上体现从易到难、从基础生物化学到分子生物学的逐渐过渡。这种安排能较好地让初学者打好实验操作基础、逐步提高操作技能、熟练掌握生物化学与分子生物学所要求的实验技能,并拥有初步进行科研的能力。
样章试读
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第一章 实验总体要求与实验基本操作 1
实验1 实验总体要求 1
实验2 基本实验操作与常用仪器使用 5
实验3 动物实验的基本操作技术 17
第二章 基本训练型实验23
实验4 考马斯亮蓝染料法测定蛋白质浓度 23
实验5 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质 27
实验6 Hanes作图法测定兔血红细胞过氧化氢酶Km值 33
实验7 血清ALT和AST活性的测定(赖氏法) 38
实验8 血清总胆固醇浓度的测定 44
实验9 改良J-G法测定血清胆红素 48
实验10 琼脂糖凝胶电泳分离DNA 55
实验11 聚合酶链反应(PCR)扩增DNA 58
实验12 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 64
实验13 凝胶过滤分离蛋白质 72
实验14 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离蛋白质 78
实验15 小鼠肝组织DNA的提取及鉴定 84
实验16 TRIzol试剂法提取总 RNA 89
实验17 逆转录(RT)技术 93
实验18 定量PCR技术 96
第三章 综合提高型实验101
实验19 重组质粒的构建 101
实验20 质粒DNA的转化 111
实验21 质粒DNA的制备 117
实验22 质粒DNA的限制性内切酶酶切分析 121
实验23 外源基因在大肠埃希菌中的诱导表达 125
实验24 免疫印迹检测 131
实验25 GST Pull-down分析 136
第四章 研究应用型实验 144
实验26 实验讨论课 144
实验27 文献综述训练 144