《生物化学实验教程》(第四版)在第三版的基础上增加了荧光分析蛋白质构象变化、分子伴侣辅助蛋白质复性和NanoDrop分析DNA增色效应等实验内容。全书共分为三部分:第一部分为基础性实验,介绍生物化学实验的基本原理和技术。第二部分为综合性实验,主要介绍蛋白质的纯化鉴定及部分分子生物学实验技术。以上两部分实验包含了层析、紫外 可见分光光度、荧光分光光度、电泳、离心分离和生物发光等技术,涉及蛋白质、核酸、维生素、糖、脂和激素的分离、制备、定性和定量分析,以及生物大分子的结构和功能分析。第三部分为研究性实验,实验用时略长,以培养学生独立科研能力为主要目的。
样章试读
目录
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第一部分基础性实验
实验1氨基酸的分离鉴定——纸层析法(2)
实验2凝胶层析法使蛋白质脱盐(4)
实验3蛋白质的沉淀与透析(7)
实验4膜分离技术——离心超滤法纯化和浓缩蛋白质(11)
实验5微量凯氏(Micro-Kjeldahl)定氮法测定蛋白质含量(13)
实验6利用分光光度计测定双缩脲反应的有色产物吸收光谱(18)
实验7BCA法测定蛋白质含量(20)
实验8考马斯亮蓝法测定蛋白质含量(22)
实验9紫外吸收法测定蛋白质含量(25)
实验10乙酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白(27)
实验11聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分离血清蛋白(31)
实验12利用蛋白质内源荧光分析蛋白质构象变化(35)
实验13分子伴侣对变性萤火虫萤光素酶复性的影响(38)
实验14酶的特异性(41)
实验15酶促反应动力学(43)
实验16琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制(48)
实验17脲酶Km值的测定(50)
实验18过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分离及鉴定(54)
实验19酵母RNA的提取与组分鉴定(57)
实验20动物肝脏DNA的提取与检测(60)
实验21RNA定量测定——改良苔黑酚法(63)
实验22核酸的定量测定——紫外分光光度法(66)
实验23乙酸纤维素薄膜电泳分离核苷酸(68)
实验24NanoDrop分析DNA增色效应(71)
实验25维生素C的定量测定——2,6二氯酚靛酚滴定法(74)
实验26还原糖含量的测定——3,5二硝基水杨酸(DNS)比色法(77)
实验27血糖含量的测定——GODPAP法(79)
实验28植物组织中可溶性糖含量的测定——蒽酮法(81)
实验29饱食、饥饿、肾上腺素、胰岛素对肝糖原含量的影响(84)
实验30小麦萌发前后淀粉酶活力的比较(86)
实验31脂肪酸的β氧化(89)
实验32血清中谷丙转氨酶活性的测定(92)
实验33生物发光法测定ATP浓度(95)
第二部分综合性实验
实验34细胞色素c的提取制备与含量测定(100)
实验35凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量(104)
实验36质粒的提取、酶切与电泳分析(108)
实验37聚合酶链反应(113)
实验38蛋白质印迹法(Western-Blotting)(116)
第三部分研究性实验
实验39转基因植物的PCR鉴定(126)
实验40植物热激蛋白的蛋白质印迹分析(127)
实验41阅读框影响融合蛋白表达正确性(128)
附录一实验报告范例(130)
附录二生物化学实验常用参考数据(136)
主要参考文献(145)