本书主要介绍蛋白质等生物分子的分离纯化和分析鉴定方面的实验技术,选编了当前在蛋白质化学、蛋白质组学及生物工程下游技术中所应用到的层析、电泳等实验方法。书中步骤描述具体细致、实验过程系统完整,全书图文并茂、数据详尽,具有较强的指导性和可操作性。生命科学相关专业的学生通过本教材与实验课的学习,能够了解和掌握当前在生命科学研究、应用和生产领域内对天然以及基因重组生物分子的分离、纯化、制备、分析、鉴定、数据处理等多方面的生化分析技术方法、实验原理、实验设计、操作技术以及相关仪器的使用。
样章试读
目录
- 目录
丛书序
丛书前言
前言
一 基础实验部分
实验1 紫外分光光度法(测定蛋白质吸收光谱曲线及含量) 3
实验2 荧光光度测定法(测定核黄素含量) 7
实验3 离子交换层析(分离氨基酸) 11
实验4 凝胶层析(分离蛋白质及相对分子质量测定) 17
实验5 DEAEG纤维素梯度洗脱层析 23
实验6 疏水层析 29
实验7 亲和层析分离纯化胰蛋白酶(环氧氯丙烷活化法) 34
实验8 金属螯合层析 40
实验9 反相层析 45
实验10 聚焦层析 50
实验11 吸附层析(羟基磷灰石柱层析分离纯化DNA) 58
实验12 单向火箭免疫电泳 63
实验13 聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳 68
实验14 SDSG聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳(不连续体系) 75
实验15 TricineGSDSG聚丙烯酰胺凝胶电泳(分离小分子多肽) 83
实验16 管式凝胶等电聚焦 91
实验17 水平平板凝胶等电聚焦 98
实验18 潜水式琼脂糖凝胶电泳 106
实验19 印迹转移电泳 112
实验20 酶联免疫吸附测定 121
二 综合实验部分
实验21 蔗糖酶的综合分离纯化及其性质鉴定 133
实验22 亲和层析分离纯化尿激酶及其性质鉴定(溴化氰活化法) 147
实验23 双向电泳(双向电泳比较FADD和FADD-/-细胞株的蛋白质表达差异) 156
实验24 基因融合蛋白质的纯化 174
三 附录
附录A 聚丙烯酰胺凝胶电泳的蛋白质银染色法 185
附录B 常用缓冲液的配制方法 188
附录C 常用数据 196
主要参考文献 222