内容介绍
用户评论
全部咨询
内容简介
本书介绍了微生物遗传学中以细菌、噬菌体、链霉菌、酵母和丝状真菌等作研究对象的实验方法,还介绍了比较专门的实验技术,如基因定位诱变等。既反映了近年来发展起来的各项技术,也考虑到国内一般实验室的条件,使之具有较大的实用性。
本书可供从事微生物遗传学、分子生物学、基因工程研究和教学的人员以及研究生、大学生参考。
目录
- 前言
编者的话
第一部分 革兰氏阴性菌遗传实验技术
Ⅰ.大肠杆菌、沙门氏菌等
1-1 用转座子Tn10诱变分离大肠杆菌营养缺陷型
1-2 转座子Tn5诱变柠檬酸细菌
1-3 转座子Tn1721对硫细菌的诱变
1-4 Mini-Tn10插入突变库的建立
1-5 把Mini-Tn10放到目的基因近旁
1-6 鼠伤寒沙门氏菌转座子MudJ插入突变体的分离
1-7 鼠伤寒沙门氏菌嘌呤生物合成途径的调节突变体的分离
1-8 重组缺陷菌株的构建
1-9 局部诱变法
1-10 四环素敏感株的正选择(Bochner选择法)
1-11 鼠伤寒沙门氏菌基因的Hfr杂交定位
1-12 鼠伤寒沙门氏菌DNA部分串性重复株的构建
1-13 用部分染色体DNA重复菌株进行基因定位
1-14 三点杂交试验
1-15 大肠杆菌基因缺失的转移
1-16 鼠伤寒沙门氏菌基因向大肠杆菌的转移
1-17 静止基因激活突变体的分离
1-18 插入突变体的缺失定位
1-19 大肠杆菌基因的体内克隆
1-20 宋内氏志贺氏菌(Shigella sonnei)Ⅰ相大质粒的Tn5标记和诱动转移
1-21 宋内氏志贺氏菌(Shigella sonnei)Ⅰ相大质粒的Tn501标记和共转移
1-22 广泛宿主范围的基因转移
1-23 电穿孔法在细菌质粒DNA转化中的应用
Ⅱ.根癌农杆菌
1-24 Ti质粒及其他大质粒的检测
1-25 Ti质粒的大量制备和纯化
1-26 根癌农杆菌Ti质粒的接合转移和转化
1-27 三亲菌株接合
1-28 植物表达载体及表达框架的构建
1-29 中间载体向根癌农杆菌的转移和转化
1-30 用含有外源基因的根癌农杆菌转化植物组织
1-31 外源基因在转基因植株中的表达
第二部分 革兰氏阳性菌遗传实验技术
Ⅰ.枯草杆菌
2-1 枯草杆菌噬菌体普遍性转导
2-2 枯草杆菌原生质体的转化
2-3 枯草杆菌质粒DNA的提取
2-4 枯草杆菌感受态细胞的转化
2-5 枯草杆菌启动子的克隆
2-6 枯草杆菌中利用质粒克隆基因
2-7 利用ρ11噬菌体进行基因克隆
2-8 枯草杆菌特异转导噬菌体的构建
Ⅱ.棒状杆菌
2-9 氨基酸缺陷型的筛选
2-10 产氨基酸抗反馈调节突变株的选育
2-11 棒状杆菌质粒的提取
2-12 质粒DNA转化棒状杆菌原生质体
第三部分 链霉菌遗传实验技术
3-1 链霉菌总DNA的分离
3-2 链霉菌质粒DNA的分离
3-3 链霉菌原生质体的制备和再生
3-4 质粒DNA转化链霉菌原生质体
3-5 利用质粒作为载体的链霉菌基因克隆
3-6 链霉菌原生质体融合
第四部分 酵母菌遗传实验技术
Ⅰ.酵母菌的遗传分析
4-1 酵母菌的遗传分析和基因定位
Ⅱ.酵母菌质粒载体的构建
4-2 酿酒酵母质粒DNA的分离
4-3 基因克隆载体的构建
4-4 酵母表达载体的构建
4-5 酵母分泌载体的构建
Ⅲ.酵母菌转化
4-6 酵母菌原生质体转化法
4-7 酵母菌完整细胞转化法
4-8 酵母菌转化子的鉴定
Ⅳ.酵母菌外源基因的克隆和表达
4-9 酵母菌染色体DNA片段的分离
4-10 酵母菌基因文库的构建
4-11 转化子中目的基因的检测
4-12 TRP5基因在酵母受体中的表达
Ⅴ.酵母菌原生质体融合
4-13 酵母菌原生质体的制备和再生
4-14 PEG诱导酵母菌原生质体融合
4-15 电场诱导酵母菌原生质体融合
4-16 细胞核转入原生质体的操作技术
4-17 微小(mini)原生质体融合法
4-18 线粒体转入原生质体的操作技术
4-19 酵母菌原生质体的融合子鉴定方法
Ⅵ.酵母细胞质遗传实验技术
4-20 酵母线粒体突变株[rho0,rho﹣,antR,及mit﹣]的分离
4-21 线粒体突变株的鉴定标准
4-22 线粒体基因重组
4-23 酵母菌杀伤因子(killer factor)的分离和鉴定
第五部分 丝状真菌遗传实验技术
5-1 纤维素酶抗阻遏突变体的选育
5-2 玉米黑粉菌线粒体DNA的分离和纯化
5-3 麦角菌的原生质体诱变和营养缺陷型选择
5-4 草菇的原生质体诱变和营养缺陷型选择
5-5 曲霉属内原生质体融合后遗传重组
5-6 外源基因导入丝状真菌的一般方法
5-7 粟胡麻斑病菌H1b-2菌株的原生质体转化
5-8 潮霉素B抗药性基因hph在洋葱灰霉病中的转化
第六部分 在λ噬菌体中构建基因库
6-1 λ噬菌体的生长和制备
6-2 噬菌体DNA的大量制备和提纯
6-3 在噬菌体中构建基因组DNA库
6-4 包装的文库效价测定及涂平板培养
6-5 λ噬菌体包装抽提物的制备
第七部分 M13克隆
7-1 M13噬菌体原液的制备和测定
7-2 M13噬菌体DNA的制备
7-3 克隆到M13载体和感受态细胞的转染
7-4 M13重组子的分析和鉴定
第八部分 体外诱变
8-1 克隆DNA的体外定位诱变——含尿嘧啶单链DNA模板法
8-2 克隆DNA的体外定位诱变——脱氧硫代核苷酸保护法
8-3 聚合酶链反应(PCR)——DNA体外酶促扩增法
第九部分 附录
9-1 常用培养基
9-2 溶液和缓冲液的配制
9-3 限制酶
9-4 DNA片段在琼脂糖和丙烯酰胺凝胶中有效分离范围
9-5 DNA分子量标记(kb)
9-6 抗生素
9-7 一些常用单位
9-8 常用仪器