《基因工程实验教程》是以基因工程实验为主要内容,编写的一本实验 教材。全书共包括21个基因工程方面的基本实验,同时也涵盖了与基因工程密切相关的部分细胞培养技术、生物信息学计算机操作技术等内容,书后还附有基因工程常用试剂配制、实验室常用数据和实验室安全的一般常识。书中大部分实验是我们在教学中通过反复摸索后才搬进学生课堂的,也有一部分实验借鉴了已发表的科研论文和互联网的资料以及编写人员自己的相关科研成果。所编写的每个实验都配有基础知识链接和背景资料的介绍,对每个实验的原理和操作步骤以及所出现问题的分析,力求解释详尽,以便于读者能较快地掌握实验原理和操作技巧。
样章试读
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第一部分 基因工程实验
第一章 组织细胞遗传物质的提取(1)
实验一 动物胸腺或脾脏有核细胞基因组DNA提取(1)
实验二 哺乳动物组织mRNA提取(3)
实验三 植物组织的基因组DNA提取(6)
实验四 植物细胞RNA提取(8)
实验五 细菌基因组DNA的制备(10)
实验六 大肠杆菌质粒DNA的小量提取(12)
第二章 核酸凝胶电泳分离与纯化方法(15)
实验七 核酸的琼脂糖凝胶电泳(15)
实验八 DNA片段的回收与纯化(17)
实验九 紫外分光光度法测定核酸含量(19)
实验十 PCR反应及其产物检测(21)
第三章 DNA的重组连接和克隆的筛选鉴定(27)
实验十一 限制性内切酶切割DNA(27)
实验十二 DNA的重组和连接(32)
实验十三 大肠杆菌感受态细胞的制备和重组DNA分子的转化(35)
实验十四 重组转化子DNA的鉴定(蓝白斑筛选法)(39)
实验十五 转化克隆的筛选和鉴定(41)
实验十六 工程菌的诱导和酶活性检测(44)
实验十七 SDS PAGE电泳(48)
第四章 综合大实验(54)
实验十八 基因工程综合大实验(54)
实验十九 植物基因转化与转基因植株鉴定(57)
第五章 基因工程相关的其他实验方法(65)
实验二十 限制性片段长度多态性(RFLP)分析(65)
实验二十一 免疫印迹法(Western blot)检测蛋白表达(67)
第二部分 细胞培养技术
第六章 细胞培养的一般操作过程(74)
实验二十二实验器械、器皿的清洗、包装和消毒(74)
实验二十三 应用微孔滤膜过滤除菌(78)
实验二十四 细胞培养用液的配制(80)
实验二十五 小鼠肾脏细胞原代培养(82)
实验二十六 动物细胞的传代培养(85)
实验二十七 烟草叶片愈伤组织诱导和器官发生(86)
实验二十八 培养细胞的冻存与复苏(89)
实验二十九 细胞计数(91)
实验三十 细胞活力的测定方法(93)
实验三十一 动物细胞融合(94)
实验三十二 MTT法检测细胞相对数和相对活力(97)
实验三十三 细胞的基因转染实验—脂质体法(99)
第三部分 生物信息学
第七章 生物信息学实验(103)
实验三十四 生物信息学数据库(103)
实验三十五 核酸序列检索(106)
实验三十六 原核与真核生物核酸序列分析(109)
实验三十七 核酸序列分析和引物设计(120)
实验三十八 蛋白质序列分析(130)
第四部分附录
第八章 基因工程常用试剂配制及常用数据(141)
附录一 基因工程常用试剂配制(141)
附录二 PCR引物设计时常用Ⅱ型限制性内切酶的酶切位点保护碱基(154)
附录三 常用的基因工程型宿主菌的相关信息(157)
附录四 基因工程常用数据(159)
附录五 常用化学试剂的一般常识(167)
附录六 分子生物学综合数据库工具箱(176)