本书包括46个实验,涵盖基础免疫学实验、临床免疫学实验及设计性实验三部分内容。基础免疫学实验是本书重点介绍的内容,按照实验动物、免疫细胞和免疫分子实验的逻辑顺序编写。实验动物部分既包括了传统的实验动物基本操作、免疫相关动物模型的建立,同时也增加了常用的转基因、基因突变或基因敲除小鼠特点的介绍。免疫细胞实验部分包括免疫细胞分离、分选及功能检测,同时将流式细胞术的分析、分选技术融入相关实验内容。免疫分子实验部分包括了经典的抗体、补体和细胞因子的检测方法,并介绍了Real-time PCR、流式细胞术等免疫新技术。临床免疫学实验部分结合临床检验,使用肢体金斑点层析技术、化学发光技术等检测临床早期妊娠、肿瘤标志物等。设计性实验注重对学生综合能力的培养,使其掌握独立设计综合性实验的能力。本书注重将基础实验与临床实验结合、新理论与新技术结合、验证性实验与综合设计性实验结合,内容丰富。
样章试读
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前言
第一章 实验动物基本操作 1
实验一 实验动物的抓取与同定方法 1
实验二 实验动物的给药方法 4
实验三 实验动物的采血方法 7
第二章 免疫相关疾病动物模型建立 11
实验一 小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立 11
实验二 大鼠佐剂性关节炎模型的建立 14
实验三 家兔Masugi肾炎模型的建立 16
实验四 小鼠过敏性哮喘模型的建立 19
第三章 免疫学常用小鼠品系 21
一、免疫学常用的野生型近交系小鼠 21
二、免疫学常用的转基因、基因突变或基因敲除小鼠 22
第四章 细胞培养基本操作 33
一、体内、体外细胞的差异和分化 33
二、体外培养细胞的分型 33
三、培养细胞的生长和增殖过程 34
实验一 细胞培养器材的准备与无菌操作 36
实验二 原代细胞培养 41
实验三 细胞传代培养 44
实验四 细胞冻存与复苏 46
实验五 细胞计数与活力测定 48
第五章 免疫细胞的分离与制备 52
实验一 人外周血单个核细胞的分离 52
实验二 小鼠腹腔巨噬细胞的分离 55
实验三 人外周血NK绌胞的分离 57
实验四 小鼠骨髓树突状细胞的制备 61
实验五 小鼠CD4+T淋巴细胞的分离 64
实验六 小鼠脾B细胞的分离 66
第六章 免疫细胞功能检测 69
实验一 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验 69
实验二 51Cr释放法检测NK细胞杀伤活性的测定 71
实验三 细胞毒性T细胞功能测定 73
实验四 树突状细胞对CD4+T细胞的活化和增殖作用检测 75
实验五 树突状细胞诱导CD4+T细胞分化作用检测 78
实验六 调节性T细胞免疫抑制功能实验 81
实验七 免疫细胞凋亡检测 84
实验八 免疫印迹法检测免疫细胞信号蛋白ERK活化 92
第七章 抗体的人工制备 98
实验一 多克隆抗体的制备 98
实验二 单克隆抗体的制备 100
第八章 经典抗原抗体反应 104
实验一 直接凝集反应 104
实验二 间接凝集试验 108
实验三 单向琼脂扩散实验 110
实验四 双向琼脂扩散实验 112
实验五 溶血空斑实验 114
第九章 细胞因子检测 117
实验一 ELISA双抗夹心法检测细胞因子 117
实验二 ELISOPT检测细胞因子 119
实验三 FACS检测细胞因子 121
实验四 Real time PCR检测细胞因子 123
实验五 小鼠干扰素诱导的抗病毒活性的检测 130
实验六 趋化实验检测趋化因子的趋化功能 132
第十章 临床免疫学实验 135
实验一 豚鼠速发型超敏反应 135
实验二 血清总IgE水平测定 136
实验三 结核菌素试验 138
实验四 化学发光免疫分析技术检测肿瘤标志物 140
实验五 酶联免疫吸附试验检测乙肝五项指标 141
实验六 免疫荧光技术检测抗核抗体 143
实验七 胶体金斑点层析技术检测早期妊娠 145
第十一章 设计性实验 147
一、设计性实验的选题、设计与实施 147
二、参考范例 151
主要参考文献 154