本书介绍了基本的、常用的分子生物学和基因工程实验技术。全书分为三部分,第一部分为基础性实验,针对分子生物学基本实验技能的培养,主要介绍一些短小独立的分子生物学和基因工程基本实验方案,由于每个实验可在半日内完成,并且成功率较高,这些实验特别适合于本科实验教学的日程安排。第二部分为综述性实验,实验略微复杂,适合于高年级本科生。第三部分为研究性实验,实验内容贴近科研工作,以培养独立科研能力为主要目的。
本书的实验方法严谨可靠,可操作性强,不仅可以作为高等师范院校生命科学专业的本、专科学生实验课程教材,也可供非师范院校相关专业的学生和生命科学工作者参考。
样章试读
目录
- 出版说明
前言
第一部分 基础性实验
实验1 质粒的分离——碱性SDS法
实验2 Silica硅石粉法纯化质粒
实验3 离心柱法提取质粒DNA
实验4 质粒的提取——煮沸法
实验5 核酸琼脂糖凝胶电泳及“玻璃奶”法纯化回收DNA片段
实验6 离心柱法回收琼脂糖凝胶中DNA片段
实验7 DNA片段的连接(向质粒载体中插入外源DNA)
实验8 E.coli感受态细胞的制备、转化及转化子的鉴定(蓝白斑筛选法)
实验9 聚合酶链式反应(PCR)技术
实验10 菌落PCR方法快速筛选细菌重组子
实验11 重组子的插入方向鉴定(酶切法)
实验12 噬菌体铺板
实验13 M13噬菌体DNA的提取
实验14 SDS法小量提取植物基因组DNA
实验15 CTAB法小量提取植物基因组DNA
实验16 动物组织细胞基因组DNA提取
实验17 血液基因组DNA的纯化分离
实验18 Trizol试剂快速提取(动)植物总RNA
实验19 总RNA的变性琼脂糖凝胶电泳检测
第二部分 综合性实验
实验20 反转录PCR
实验21 植物启动子表达的组织特异性
——β葡萄糖醛酸糖苷酶(GUS)组织化学染色
实验22 外源基因在原核细胞中表达及分析
——谷胱甘肽S转移酶融合蛋白质的表达及纯化
实验23 外源基因在原核细胞中表达及分析
——His6标记蛋白质的原核表达和纯化
实验24 Western-blotting分析
实验25 高灵敏Western-blotting分析(化学发光法)
第三部分 研究性实验
实验26 地高辛标记探针的Southern杂交
实验27 菌落原位杂交
实验28 转基因植物的PCR检测
实验29 花序浸泡法转化拟南芥及转化子的筛选
实验30 叶盘法转化烟草
参考文献