本书比较系统、全面地介绍了生物化学常用实验技术与方法。全书共分为三部分,第一部分为基础性实验,介绍生物化学实验的基本原理和技术。第二部分为综合性实验,主要介绍蛋白质的纯化和鉴定及部分分子生物学实验技术。这两部分内容涵盖蛋白质、核酸、酶、维生素、糖、脂、激素的分离、制备、性质功能及定性和定量分析技术,包括层析法、分光光度法、电泳法、离心分离法及物质代谢研究法等。第三部分为研究性实验,以培养学生独立科研能力为主要目的。
样章试读
目录
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第三版前言
第一部分基础性实验
实验1氨基酸的分离鉴定——纸层析法(2)
实验2凝胶层析法使蛋白质脱盐(3)
实验3蛋白质的沉淀与透析(6)
实验4膜分离技术——离心超滤法纯化和浓缩蛋白质(8)
实验5微量凯氏(MicroKjeldahl)定氮法测定蛋白质含量(10)
实验6利用分光光度计测定双缩脲反应的有色产物吸收光谱(14)
实验7BCA法测定蛋白质含量(16)
实验8考马斯亮蓝法(Bradford法)测定蛋白质含量(18)
实验9紫外吸收法测定蛋白质含量(20)
实验10乙酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白(22)
实验11聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分离血清蛋白(25)
实验12酶的特异性(29)
实验13酶促反应动力学——pH、温度、激活剂、抑制剂对酶促
反应速度的影响(31)
实验14琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制(35)
实验15脲酶Km值的测定(36)
实验16过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分离及鉴定(39)
实验17酵母RNA的提取与组分鉴定(42)
实验18动物肝脏DNA的提取与检测(44)
实验19RNA定量测定——改良苔黑酚法(46)
实验20核酸的定量测定——紫外分光光度法(48)
实验21乙酸纤维素薄膜电泳分离核苷酸(50)
实验22维生素C的定量测定——2,6二氯酚靛酚滴定法(52)
实验23还原糖的测定——3,5二硝基水杨酸(DNS)比色法(54)
实验24血糖含量的测定(FolinWu法)(56)
实验25植物组织中可溶性糖含量的测定(蒽酮法)(58)
实验26饱食、饥饿、肾上腺素、胰岛素对肝糖原含量的影响(60)
实验27小麦萌发前后淀粉酶活性的比较(62)
实验28脂肪酸的β氧化(64)
实验29血清中谷丙转氨酶活性的测定(67)
第二部分综合性实验
实验30细胞色素C的提取制备与含量测定(70)
实验31凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量(73)
实验32质粒的提取、酶切与电泳分析(77)
实验33聚合酶链反应(81)
实验34蛋白质印迹(WesternBlotting)(84)
第三部分研究性实验
实验35转基因植物的PCR鉴定(92)
实验36植物热激蛋白的Westernblotting分析(93)
实验37读码框架影响融合蛋白表达正确性(94)
附录一实验报告范例(96)
附录二生物化学实验常用参考数据(101)
主要参考文献(108)