实验课是微生物学教学过程的重要一环。本书的内容分为5篇,包括细菌学实验、病毒学实验、真菌学实验、其他病原微生物实验和基本分子微生物学技术,共计71项实验内容。每项实验具体介绍了实验目的、实验原理、实验材料、实验方法与步骤及注意事项,具有良好的可操作性。书后的附录列出了微生物学实验室常用的试剂配制方法、培养基制备方法、菌种保藏方法,以及实验动物管理的相关内容,便于广大师生查阅参考。
样章试读
目录
- 目录
医学微生物学实验室生物安全 1
医学微生物学实验的目的与要求 5
医学微生物学实验室规则 6
第一篇 细菌学实验
第一章 细菌的染色与形态、结构观察 9
实验一 油镜显微镜的使用及细菌形态结构的观察 9
实验二 细菌涂片标本的制备及简单染色法 12
实验三 细菌的革兰染色法 15
实验四 细菌特殊结构(芽胞、荚膜、鞭毛)的染色法 17
实验五 活菌运动观察 22
第二章 细菌的培养及其生化代谢产物的检查 24
实验六 细菌培养基的制备与灭菌实验 24
实验七 细菌的分离接种技术与培养方法 27
实验八 细菌培养物的性状观察 36
实验九 糖发酵实验 38
实验十 蛋白质代谢实验 41
实验十一 其他代谢实验 43
第三章 细菌的遗传与变异及耐药性实验 45
实验十二 噬菌体裂解细菌实验 45
实验十三 细菌的形态变异实验(L型、H-O变异、S-R变异) 49
实验十四 细菌的药物敏感性实验(纸片法、试管法) 52
实验十五 细菌耐药性质粒转化实验(化学转化和电转化) 56
第四章 动物实验 60
实验十六 小鼠腹腔接种方法——金黄色葡萄球菌小鼠腹腔接种方法 60
实验十七 小鼠尸体解剖与细菌学检查——金黄色葡萄球菌感染小鼠尸体解剖与细菌学检查 63
第五章 环境、体表细菌的检查及消毒与灭菌实验 66
实验十八 空气中细菌的检测(沉降法) 66
实验十九 正常人体皮肤及随身物品细菌的检查 68
实验二十 鼻咽腔及口腔中细菌的检查 71
实验二十一 消毒与灭菌实验 72
第六章 病原性球菌 78
实验二十二 病原性球菌的形态、染色性及培养特性 78
实验二十三 葡萄球菌血浆凝固酶实验 80
实验二十四 抗链球菌溶血素“O”(ASO)实验——乳胶凝集法 82
实验二十五 肺炎链球菌胆汁溶解实验 83
实验二十六 病原性球菌脓汁标本的检验 84
第七章 肠道杆菌 87
实验二十七 粪便标本的检验 87
实验二十八 肥达反应 93
第八章 霍乱弧菌和幽门螺杆菌 95
实验二十九 霍乱弧菌、副溶血弧菌的检验 95
实验三十 幽门螺杆菌、空肠弯曲菌的检验 98
第九章 呼吸道感染细菌的检验 101
实验三十一 结核分枝杆菌的检验 101
实验三十二 白喉棒状杆菌的检验 107
第十章 厌氧性细菌的检验 111
实验三十三 厌氧芽胞梭菌的形态、染色性及培养特性 111
实验三十四 无芽胞厌氧菌的形态、染色性及培养特性 114
实验三十五 破伤风外毒素与抗毒素中和实验 116
实验三十六 产气荚膜梭菌动物实验 117
实验三十七 临床标本厌氧菌的分离培养与鉴定 118
第十一章 动物源性细菌的检验 123
实验三十八 炭疽芽胞杆菌的检验 123
实验三十九 布鲁菌的检验 126
实验四十 鼠疫耶尔森菌的检验 128
第二篇 病毒学实验
第十二章 病毒的形态学观察 133
实验四十一 电子显微镜观察负染病毒 133
实验四十二 病毒包涵体的检查 136
第十三章 病毒的分离培养 139
实验四十三 病毒的组织细胞培养方法 139
实验四十四 病毒的鸡胚培养方法 143
实验四十五 病毒的动物接种 146
第十四章 病毒的感染性定量测定 148
实验四十六 病毒组织半数感染量(TCID50)的测定 148
实验四十七 病毒的空(蚀)斑形成实验 152
第十五章 病毒抗原的检测 155
实验四十八 直接免疫荧光实验 155
实验四十九 酶联免疫吸附实验——双抗体夹心法 157
实验五十 免疫印迹 159
第十六章 病毒抗体的检测 163
实验五十一 血凝实验与血凝抑制实验 163
实验五十二 补体结合实验 166
实验五十三 酶联免疫吸附实验 168
实验五十四 病毒中和实验 171
第十七章 病毒核酸的检测 173
实验五十五 聚合酶链反应定性检测病毒核酸 173
实验五十六 荧光定量PCR 检测病毒核酸 175
实验五十七 原位杂交法检测病毒核酸 178
第三篇 真菌学实验
实验五十八 真菌的培养及形态观察 183
实验五十九 真菌病临床标本的直接镜检与染色观察 185
实验六十 真菌DNA快速提取及18SrDNA序列测定鉴定 187
第四篇 其他病原微生物实验
实验六十一 支原体的检验 193
实验六十二 衣原体的检验 197
实验六十三 钩端螺旋体的检验 201
实验六十四 立克次体的检验 206
实验六十五 放线菌的检验 209
第五篇 基本分子微生物学技术
实验六十六 重组质粒构建 215
实验六十七 外源性蛋白的重组表达 220
实验六十八 细菌基因敲除技术 231
实验六十九 转座子技术 242
实验七十 荧光定量 PCR 245
实验七十一 菌群分析 252
附录
微生物学实验室常用的试剂 259
一、常用染色液的配制 259
二、常用培养基的制备 259
三、常用试剂和溶液的配制 267
四、洗涤液的配制与使用 271
五、常用消毒液和清洁液的配制法 272
菌种保藏 275
一、传代培养保藏法 275
二、液体石蜡覆盖保藏法 275
三、载体保藏法 276
四、悬液保藏法 277
五、寄主保藏法 278
六、冷冻保藏法 278
实验动物管理 281