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本书包括18个实验，分别是基因组DNA的提取、总RNA和mRNA的提取、质粒DNA的提取、目的基因的获得、限制性内切酶的酶切反应、凝胶电泳法进行DNA的分离和纯化、DNA片段的体外连接、大肠杆菌感受态细胞的制备、重组子的转化、菌落PCR筛选阳性重组子、重组质粒的酶切鉴定、外源基因在大肠杆菌中的诱导表达、基因表达产物的检测分析、Western Blotting实验、Southern印迹实验、全长cDNA文库的构建、凝胶阻滞实验和染色质免疫共沉淀技术。

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  前言
  实验1 基因组DNA的提取 1
  实验1.1 植物基因组DNA的提取 2
  实验1.2 动物基因组DNA的提取 3
  实验1.3 细菌基因组DNA的提取 4
  实验1.4 酵母菌基因组DNA的提取 5
  实验2 总RNA和mRNA的提取 8
  实验2.1 Trizol法提取总RNA 9
  实验2.2 异硫氰酸胍/酚一步法提取总RNA 10
  实验2.3 总RNA提取试剂盒 11
  实验2.4 mRNA的分离纯化 12
  实验3 质粒DNA的提取 15
  实验3.1 碱裂解法少量提取质粒DNA 17
  实验3.2 少量质粒提取试剂盒 19
  实验4 目的基因的获得 21
  实验4.1 PCR扩增 26
  实验4.2 反转录PCR.27
  实验5 限制性内切酶的酶切反应 30
  实验5.1 pUC 18/19质粒DNA的EcoRI单酶解 32
  实验5.2 HindIII和Sal I对pUC18/19质粒DNA的双酶切 33
  实验6 凝胶电泳法进行DNA的分离和纯化 35
  实验7 DNA片段的体外连接 37
  实验8 大肠杆菌感受态细胞的制备 40
  实验9 重组子的转化 42
  实验10 菌落PCR筛选阳性重组子 45
  实验11 重组质粒的酶切鉴定 47
  实验12 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 49
  实验13 基因表达产物的检测分析：SDSPAGE 53
  实验14 Western Blotting(蛋白免疫印记）实验59
  实验15 Southern印迹实验63
  实验16 全长cDNA文库的构建 68
  实验17 凝胶阻滞实验78
  实验18 染色质免疫共沉淀技术 82
  参考文献 87
  附录一 基因工程实验中的常用数据和换算关系 89
  附录二 基因工程实验常用试剂、溶液和缓冲液 92
  附录三 PCR实验引物设计原则 95