本教材主要由13个综合实验组成。在实验设计上,每个综合实验都以产品生产为主线,综合利用多种实验技术,力争使学生得到多方面的综合训练;内容上,涵盖了发酵工程、基因工程、酶工程、细胞工程、生物分离工程及生物信息学等;应用上,包括了医药、能源、食品等,特别是生物柴油、燃料乙醇、纤维素的利用等目前生物工程领域的研究热点。教材突出生物工程实验的综合性与现代性。
样章试读
目录
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丛书序
前言
综合实验1 青霉素的发酵生产及半合成抗生素的制备 1
实验1-1 青霉素的发酵生产 3
实验1-2 发酵体系中氨态氮含量的测定 6
实验1-3 青霉素效价的测定 8
实验1-4 青霉素酰化酶产生菌的筛选 11
实验1-5 青霉素酰化酶的酶活测定 13
实验1-6 青霉素酰化酶的发酵生产与分离纯化 15
实验1-7 青霉素酰化酶的固定化 30
实验1-8 固定化青霉素酰化酶催化制备7-ADCA 34
综合实验2 微生物发酵生产油脂及生物柴油的制备 36
实验2-1 微生物发酵产油脂 38
实验2-2 油脂的提取与成分分析 39
实验2-3 酶法转化生成生物柴油 43
综合实验3 玉米超氧化物歧化酶提取与固定化酵母乙醇发酵 46
实验3-1 玉米超氧化物歧化酶的提取 48
实验3-2 超氧化物歧化酶(SOD)活力测定 50
实验3-3 玉米粉的液化、糖化 52
实验3-4 固定化酵母乙醇发酵 54
实验3-5 乙醇发酵分析 58
综合实验4 乳酸发酵及猕猴桃汁乳酸发酵饮料的制备 61
实验4-1 乳酸菌的分离与筛选 63
实验4-2 猕猴桃汁乳酸发酵饮料的制备 65
实验4-3 细菌L-乳酸发酵 68
综合实验5 黑曲霉发酵生产柠檬酸 73
实验5-1 黑曲霉孢子的制备 75
实验5-2 种子培养 78
实验5-3 发酵罐的构造认识及空消 82
实验5-4 薯干粉/玉米粉液体深层发酵 85
实验5-5 柠檬酸发酵分析 90
实验5-6 发酵液的中和、酸解 95
实验5-7 粗柠檬酸溶液的脱色及离子交换净化 96
实验5-8 柠檬酸溶液的浓缩、结晶及干燥 99
综合实验6 纤维素酶的固态发酵生产和分离纯化 102
实验6-1 纤维素酶产生菌的选育 104
实验6-2 纤维素酶的活性测定 107
实验6-3 固态发酵产纤维素酶 111
实验6-4 纤维素酶的分离纯化 114
实验6-5 纤维素酶糖化玉米芯发酵生产乙醇 123
综合实验7 基因工程菌发酵生产重组核糖核酸酶A 128
实验7-1 重组核糖核酸酶A表达载体构建 129
实验7-2 重组核糖核酸酶A诱导表达 136
实验7-3 重组核糖核酸酶A亲和纯化 138
实验7-4 重组核糖核酸酶A活性鉴定 141
综合实验8 几丁质酶的发酵生产及异源表达 143
实验8-1 几丁质酶产生菌的筛选 144
实验8-2 产几丁质酶培养基的统计学优化 148
实验8-3 几丁质酶的分离纯化 153
实验8-4 几丁质酶的酶学性质 156
实验8-5 几丁质酶基因的克隆与异源表达 158
综合实验9 木瓜蛋白酶的提取制备及壳聚糖的酶法水解 165
实验9-1 木瓜蛋白酶的提取 166
实验9-2 木瓜蛋白酶活力测定 169
实验9-3 木瓜蛋白酶的分离纯化 171
实验9-4 木瓜蛋白酶水解壳聚糖 177
实验9-5 设计实验 180
综合实验10 利用固定化酵母细胞生产1,6-二磷酸果糖 181
实验10-1 酵母细胞的固定化 182
实验10-2 固定化酵母催化磷酸化反应 185
实验10-3 固定化酵母细胞连续制备1,6-二磷酸果糖 188
实验10-4 离子交换法提取1,6-二磷酸果糖 189
综合实验11 螺旋蔟气升式光生物反应器培养及藻蓝蛋白的提取纯化 193
实验11-1 螺旋藻气升式光生物反应器培养 194
实验11-2 螺旋藻藻蓝蛋白的提取 197
实验11-3 螺旋藻藻蓝蛋白的纯化 200
实验11-4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定藻蓝蛋白的相对分子质量 204
综合实验12 红豆杉细胞培养及次级代谢产物的检测分析 208
实验12-1 红豆杉细胞培养 210
实验12-2 红豆杉细胞培养物中紫杉烷的分离鉴定 215
实验12-3 红豆杉细胞提取物对肿瘤细胞的作用 218
综合实验13 不同来源细菌的系统发育关系分析 221
实验13-1 细菌总DNA提取与琼脂糖凝胶电泳检测 222
实验13-2 16S rDNA的PCR扩增与琼脂糖凝胶电泳 226
实验13-3 16S rDNA序列的克隆 229
实验13-4 阳性克隆的筛选 232
实验13-5 系统发育树分析 234
参考文献 238
附录1 培养基和试剂、溶液的配制 242
附录2 缓冲液的配制 248
附录3 硫酸铵饱和度的常用表 253