本书着重介绍微生物学实验的基本技术,适当增加了部分在生产、科研中常用的新技术。全书共94个常用实验,分为三部分:基础实验、综合实验和应用实验。基础实验突出微生物学实验的特点,系统介绍了微生物学实验的基本技术——无菌操作技术、显微技术、制片染色技术、纯培养技术、消毒灭菌技术、生长测定技术、生理生化实验技术、分子微生物学基础技术及免疫学技术等。综合实验介绍了常用的综合实验技术——抗生素效价及酶活力的测定、诱变育种、原生质体融合、细菌接合、应用微生物的分离与鉴定、噬菌体的分离纯化与效价测定及动物病毒的鸡胚培养等技术。应用实验结合生产和科研的实际,介绍了常用的应用实验技术——应用微生物的筛选、菌种保藏、食品及药品中微生物的检测、环境中微生物的检测、致癌剂的微生物法检测、固定化活细胞的制备及其发酵试验、高密度培养、发酵培养基配方试验、发酵条件的优选试验、台式自控发酵罐的发酵试验等。各单位可根据自己的教学要求和实际条件,选做相应的实验。书后附有相关染色液、试剂、溶液、消毒剂及培养基等的配制方法,还附有细菌鉴定及检索、常用菌种和病毒学名及饮用水、食品、药品等国家卫生标准等,方便使用。此外,授课教师通过书后教学课件索取方式可获赠教学课件一份。
样章试读
目录
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前言
实验须知
第一单元 无菌概念和无菌操作技术
实验1-1 环境及人体表面微生物的检测 1
实验1-2 无菌操作技术 2
第二单元 显微技术
实验1-3 显微镜的使用及细菌形态的观察 5
第三单元 微生物制片及染色技术
实验1-4 细菌的单染色法 29
实验1-5 革兰氏染色法 30
实验1-6 细菌的抗酸性染色法 32
实验1-7 细菌芽孢染色法 33
实验1-8 鞭毛染色法及活细菌运动性的观察 34
实验1-9 荚膜染色法 36
实验1-10 微生物拟核的体内和体外染色观察 37
实验1-11 细菌细胞壁的染色和质壁分离的观察 39
实验1-12 放线菌形态的观察 40
实验1-13 酵母菌形态及其子囊孢子的观察 42
实验1-14 霉菌形态及其接合孢子的观察 44
实验1-15 伞菌担子及担孢子形态的观察 47
实验1-16 昆虫病毒多角体的观察 48
第四单元 微生物纯培养技术
实验1-17 培养基的制备 50
实验1-18 消毒与灭菌 53
实验1-19 微生物接种技术 58
实验1-20 微生物培养特征的观察与识别 62
实验1-21 厌氧微生物的培养 66
实验1-22 从土壤中分离与纯化微生物 71
实验1-23 显微操纵单细胞分离技术 74
第五单元 微生物的生长
实验1-24 微生物大小的测定 77
实验1-25 显微镜直接计数法 79
实验1-26 平板菌落计数法 82
实验1-27 光电比浊计数法 84
实验1-28 大肠埃希氏菌生长曲线的测定 85
实验1-29 霉菌生长曲线的测定(干重法) 87
实验1-30 物理因素对微生物生长的影响 88
实验1-31 化学因素对微生物生长的影响 91
实验1-32 生物因素对微生物生长的影响 93
第六单元 细菌鉴定中常规生理生化反应
实验1-33 用生长谱法测定微生物的营养要求 95
实验1-34 唯一氮源(无机)试验 96
实验1-35 细菌鉴定中常用的生理生化反应 97
第七单元 分子微生物学基础技术
实验1-36 细菌质粒DNA的小量制备 102
实验1-37 质粒DNA的转化 105
实验1-38 细菌总DNA的制备 107
实验1-39 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定酿酒酵母菌胞外蛋白质相对分子质量 109
实验1-40 微生物DNA的体外重组 112
实验1-41 聚合酶链反应(PCR)技术 113
实验1-42 核酸分子杂交 115
第八单元 免疫学技术
实验1-43 免疫血清的制备 118
实验1-44 凝集反应 122
实验1-45 环状沉淀反应 125
实验1-46 双向免疫扩散试验 127
第二部分 微生物学综合实验
实验2-1 微生物抗药性突变株的分离 129
实验2-2 微生物的诱变育种 131
实验2-3 微生物的原生质体融合 133
实验2-4 营养缺陷型突变株的诱变、筛选与鉴定 135
实验2-5 细菌的接合作用 138
实验2-6 噬菌体的分离、纯化及其效价的测定 140
实验2-7 动物病毒的鸡胚培养 144
实验2-8 芽孢杆菌属(Bacillus)种的鉴定 146
实验2-9 利用Biolog系统鉴定微生物 156
实验2-10 微生物的快速、简易检测 158
实验2-11 抗生素效价的测定 160
实验2-12 产蛋白酶和淀粉酶芽孢杆菌的分离及酶活力检测 162
第三部分 微生物学应用实验
第一单元 微生物的分离、纯化、筛选及保藏
实验3-1 从病死虫体内分离杀虫微生物 165
实验3-2 真菌的单孢子分离法 167
实验3-3 嗜盐细菌的分离与鉴定 169
实验3-4 极端嗜盐菌甘油二醚类衍生物的测定 170
实验3-5 食用菌菌种的分离与选育 172
实验3-6 细菌DNA中(G+C)mol%值的测定 173
实验3-7 菌种保藏 177
第二单元 食品、药品、化妆品微生物学检测
实验3-8 食品中菌落总数及大肠菌群的检测 184
实验3-9 肉毒梭菌及肉毒毒素的检测 188
实验3-10 沙门氏菌属的检测 191
实验3-11 志贺氏菌属的检测 195
实验3-12 金黄色葡萄球菌的检测 198
实验3-13 食品中霉菌和酵母的计数 200
实验3-14 食品中霉菌毒素的检测 202
实验3-15 罐头食品商业无菌检测 205
实验3-16 牛奶中细菌的检查 207
实验3-17 药品微生物限度检查——细菌、霉菌及酵母菌计数 210
实验3-18 微生物限度检查方法——菌落计数法的验证 212
实验3-19 药品的无菌检查 215
实验3-20 药品中细菌内毒素的检查(鲎试剂法) 218
实验3-21 抗生素抗菌谱及抗生菌抗药性的测定 222
实验3-22 化妆品的微生物学检验 224
第三单元 微生物发酵技术
实验3-23 固定化活细胞的制备及其发酵试验 228
实验3-24 微生物发酵培养基配方的正交试验 231
实验3-25 微生物摇瓶发酵条件的优选 237
实验3-26 台式自控发酵罐的发酵试验 241
实验3-27 高密度培养——乳链球菌的膜过滤培养 245
实验3-28 乳酸菌发酵制作酸奶及其分离纯化 247
第四单元 环境微生物学检测
实验3-29 水的细菌学检查 250
实验3-30 利用发光细菌检测水体生物毒性 253
实验3-31 富营养化水体中藻类检测(叶绿素a法) 256
实验3-32 利用微生物吸附法去除水体中重金属 258
实验3-33 水中五日生化需氧量的测定 260
实验3-34 微生物传感器法测定BOD值 262
实验3-35 用埃姆斯试验检测诱变剂和致癌剂 264
实验3-36 空气中微生物的检测 270
主要参考文献 274
附录 275