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内容简介
本书是一本国外广泛采用的教科书。旁征博引，深入浅出，图文并茂，得到学术界的好评，是近期基因工程领域的一本名著。书中系统地叙述重组DNA研究的历史、原理、方法及重要实验结果；全面地介绍基因工程的许多重要研究方面，如真核生物与原核生物的表达系统；详尽地评述有关基因工程的应用研究，诸如癌基因、抗体基因、遗传病、基因移植和工业生产等。全书分章列出重要参考文献，并分类编排，便于查找。
本书可供广大生物学工作者，从事遗传学、生物化学、细胞生物学、分子生物学、微生物学、动物学、植物学、医药卫生、农学的科技人员，有关院校教师、研究生和大学生参考；并可用作基因工程选修课的教材。
目录
- 前言
第1章 细胞内基因作用的确定
细胞是一切生命的基本单位
细胞像是可以扩充的微型工厂，能同时合成几千种不同的分子
细胞的分子可划分成小分子与大分子
特异的细胞催化剂——酶能有效地决定细胞中的化学反应
特定蛋白质的肽链具有独特的氨基酸序列
酶的功能表现要求其多肽链具有精确的折叠
分子活化成高能形式可促进其化学反应
通过代谢图可具体地了解细胞代谢
酶不能决定多肽链中氨基酸的次序
孟德尔的豌豆杂交试验首次揭示遗传决定物（基因）的颗粒性
染色体是细胞遗传特性的携带者
“一个基因一种蛋白质”假说
第2章 DNA是主要的遗传物质
DNA无例外地定位在染色体上
除DNA外细胞还含有RNA
遗传分子的生物学测定方法的发现
病毒是可装配的遗传单元，能从一个细胞移向另一个细胞
体积与形状互补的分子彼此具有引力
DNA直径的确定
由有规律的5′—3′磷酸二酯键将DNA或RNA的核苷酸连接起来
DNA的碱基组成随不同生物体有显著变化
DNA具有高度有序的形状
DNA的基本单位是由两条相互缠绕的多核苷酸链（即双螺旋）所组成
双螺旋是由碱基对之间的氢键维系在一起的
DNA互补性是其自我复制能力的核心
DNA复制过程中双链分开的证明
DNA分子既可变性又能复性
分开G-C碱基对要比分开A-T碱基对难些
回文结构促进链内氢键的形成
在DNA中5-甲基胞嘧啶能代替胞嘧啶
染色体只含单一的DNA分子
病毒是均一DNA分子的来源
λ噬菌体DNA可插入大肠杆菌染色体上一个特异的位点
异常转导的噬菌体可提供细菌染色体的特异片段
质粒是自主复制的微染色体
环状DNA分子可能是超卷曲（supercoiled）的
多数双螺旋是右旋螺旋，但在特定条件下某些DNA核苷酸序列可出现左旋螺旋
第3章 遗传密码的阐明
在突变的血红蛋白分子中鉴定出氨基酸的取代
细微结构遗传学的发展
基因与其多肽产物均为共线性（colinear）
RNA将DNA的信息携带到细胞质中蛋白质合成的位置上
在RNA模板上氨基酸是如何编排的？
核酸和蛋白质合成过程中酶和模板的作用
蛋白质合成是自氨基末端走向羧基末端
3种类型的RNA参与蛋白质合成
密码子含3个碱基的遗传学证据
RNA链的合成和转译都是自5′至3′方向进行的
利用合成的mRNA选定密码子
1966年6月遗传密码终于全部破译
“摆动”常常使一种tRNA可识别多种密码子
遗传密码具有普遍性吗？
普通大小的基因至少含有1200碱基对
校正基因tRNA引起遗传密码的错读
特异RNA分子合成的起始和终止信号都编码在DNA序列中
发展更加精确的系统用于体外转译外源mRNA
第4章 控制基因表达的遗传单元
阻遏物控制诱导酶的合成
几种功能相关的细菌基因集中在一个操纵子上…
启动子是RNA合成的起始信号
阻遏物分子的组成性合成
阻遏物的分离和鉴定
基因转录的正调节
弱化作用
转译的控制
早年在探索高等动植物基因调节时所遇到的困难
爪蟾核糖核蛋白体RNA基因的纯化
真核生物mRNA具有帽、尾结构
真核生物的3种RNA聚合酶
真核DNA组成核小体
动物病毒是高等细胞基因表达的模型体系
RNA病毒是通过双链DNA的中间体复制的
第5章 构建重组DNA分子的方法
核酸序列分析法的发展
限制性内切酶在DNA链上进行序列特异的切割
限制性内切酶切割谱型是高度特异的
限制性内切酶切割片段的产生导致新的有力的DNA序列分析法的发展
寡核苷酸可用化学方法合成
EcoRI酶产生含粘性末端的片段
许多酶参与DNA的复制
平整末端的DNA分子可用酶加上粘性末端
小型质粒是克隆外源基因的载体
已可对高等生物的DNA进行分子分析
科学家对无限制的基因克隆的危险性表示忧虑
Asilomar会议提出重组DNA研究的操作守则
第6章 克隆基因的分离
“安全”细菌和质粒载体的发展
何以要使用药物颉抗的质粒
克隆基因用的探针
cDNA的合成与克隆
特异cDNA克隆的鉴定
在λ噬菌体中克隆基因组的片段
粘性质粒可以克隆较大的外源DNA片段
用染色体巡查分析冗长的真核DNA
在M13噬菌体上克隆DNA提高了Sanger序列分析法的速度
Southern和Northern印迹分析
发展低丰度蛋白质编码基因的克隆操作
用寡核苷酸探针筛选基因文库
用计算机比较cDNA类型
表达型载体可用于分离特异的真核cDNA
表达型载休产物的免疫学筛选
第7章 真核基因难以想像的复杂性
断裂基因的发现
在外显子-内含子交界处发现特定的碱基序列
自主剪接的发现
第一个全序列分析的哺乳动物基因
DNA的可译框架可显示出蛋白质的编码区
分泌型蛋白质氨基末端的前导序列
内含子有时可指示出功能性蛋白质的结构域
剪接途径不同使一个基因可产生不同的mRNA
在基因的5′末端和3′末端可发现调控区域
成簇的基因家族中可能含有残留的进化痕迹
mRNA分子的逆转录作用可使基因家族扩大
真核生物DNA含有分散的重复序列
多肽前休产生蛋白质激素
第8章 体外诱变
缺失作用
插入作用
取代作用：胞嘧啶的脱氨基作用
取代作用：核苷酸类似物的参入
取代作用：核苷酸的错误参入（misincorporation）
用序列确定的寡聚核苷酸构建突变体
第9章 种系DNA片段重排形成抗体基因
抗体分子基本结构的确定
由不同基因编码的V片段和C片段
应用mRNA探针可支持V和C基因连接的假说
从骨髓瘤细胞分离有功能的抗体基因
连接之前的V区和C区基因来源于胚胎细胞
多个J片段在基因组的C片段处连接
编码重链氨基酸的DNA存在3个不连续的区域
去掉一定片段的DNA可使VH基因连到两种不同的CH基因上
剪接方式不同可使单个细胞合成具有相同VH片段的μ和δ类重链
体细胞突变为免疫球蛋白的多样性提供新的来源
用基因克隆技术确定主要组织相容性复合物（MHC）基因及其抗体的基因
第10章 肿瘤病毒
整合型DNA肿瘤病毒的克隆
SV40和多瘤病毒的肿瘤蛋白质
围绕SV40和多瘤病毒染色质的结构蛋白是由重叠基因所编码
SV40和多瘤病毒早期和晚期mRNA合成起始的各种控制信号
围绕SV40（和多瘤病毒）DNA复制起点的区域大约有100个碱基对
RNA肿瘤病毒（逆转录病毒）的复杂组织结构
强致癌逆转录病毒含有特异的致癌DNA序列
前病毒能保持与RNA基因组相同的基因序列
合成RNA的启动子位于LTR之中
逆转录病毒的癌基因常编码蛋白激酶
正常细胞的基因是逆转录病毒癌基因的祖先
确定逆转录病毒的肿瘤生成作用是否由正常细胞基因的过量表达或错误表达引起
弱致癌逆转录病毒的癌症诱导作用
关于癌症诱导的理论概括
第11章 可移动的基因
转座子移动涉及新的子代转座子产生
可移动遗传单元的存在可能是所有生物的共同特性
将可移动单元用于果蝇胚胎遗传工程
从玉米中分离Ds转座单元
RNA肿瘤病毒基因组是从可移动遗传单元进化来的吗？
是否有两类在功能上不同的转座子？
基因取代引起酵母性别转变，即盒式模型
基因转换引起锥虫抗原的改变
淋病奈瑟Neisseria球菌的基因重排引起抗原变化
第12章 DNA导入酵母细胞的实验性控制
酵母原生质球对外源DNA的吸收
酵母基因在大肠杆菌中的表达
穿梭载体
酵母也含有质粒
加入复制起点可提高转化效率
用酵母着丝粒DNA使酵母质粒具有稳定性
酵母染色体末端（端粒）的发夹回折结构
克隆的DNA在酵母染色体上的定向整合
回收性载体
基因的组织结构
酵母基因表达的调控
第13章 冠瘿质粒为载体的植物遗传工程
植物育种的常规方法
植物细胞培养
从植物培养细胞再分化为全植株
植物原生质体可再生为完整的植株
用原生质体融合产生杂交植株
在遗传上工程化的植物
冠瘿肿瘤
诱导肿瘤的质粒（Ti）
Ti质粒突变株
TDNA在植物染色体上的整合
TDNA是一种转座子吗？
TDNA的孟德尔遗传学
Ti质粒DNA可以作为载体使用
植物细胞的转化与原生质体
Ti质粒的vir片段使TDNA具有移动性
“驯化”TDNA载体使单细胞可再生为全植株
TDNA插入作用可用来分离植物基因
Ti质粒在植物遗传工程上的实际应用
第14章 将基因转移到哺乳动物细胞中
Ca﹢﹢对脊椎动物细胞摄取DNA的促进作用
胸腺嘧啶脱氧核苷激酶（TK）作为基因转染实验选择标志的原型
转化正常细胞的显性作用标志
基因在细胞内连接后的共转移作用
利用显微注射法将DNA导入哺乳动物细胞
转染的甲基化DNA的半稳定性遗传
转移基因的分离
基因转移之后的调节
通过DNA转移实验确定特异的人癌基因
人癌基因的克隆
第15章 病毒载体
猴空泡病毒（SV40）载体
SV40病毒颗粒作为载体
SV40晚期区的取代
SV40早期区的取代
对表面抗原克隆基因的分析
COS细胞中DNA的质粒式复制
通过COS细胞融合回收整合的SV40DNA
SV40载体中增强子序列的发现
牛疣病毒DNA在小鼠细胞中可像质粒那样进行复制
RNA肿瘤病毒可用作载体
第16章 外源基因导入小鼠受精卵
外源基因在染色体上的整合
外源基因的整合无染色体特异性
外源DNA可稳定地整合到生殖细胞中
外源基因在小鼠中的表达
MK融合基因在显微注射后的表达
MK融合基因的组织特异性表达
MK融合基因在后代中表达的变化
MGH融合基因的功能表达
MuLV DNA的整合
用MuLV感染早期胚胎
前病毒DNA的显微注射
基因植入受精卵所得到的初步线索
“克隆化”的动物
第17章 重组DNA与遗传病
孟德尔遗传
先天性代谢差错
先天性代谢差错的医治
早期诊断与流产
遗传疾病的DNA分析
β地中海贫血
无意义突变和框移突变
转录的突变
RNA加工的突变
镰形细胞贫血症
用合成的寡核苷酸诊断α1抗胰蛋白酶缺陷症
瓜氨酸血症与精氨酰琥珀酸合成酶mRNA的异常有关
通过连锁现象诊断基因突变
突变基因的研究
人类染色体基因的定位
体细胞遗传学
人-鼠杂交细胞
基因的亚染色体定位
染色体易位与癌
原位杂交
单个染色体的克隆
填补细胞遗传学和分子遗传学之间的鸿沟
基因治疗的前景
为地中海贫血患者导入胚胎血红蛋白
第18章 重组DNA工业的研究基础
重组DNA技术的商业潜力
商业上的基因克隆方法
从细菌中获得人胰岛素
人胰岛素的结构
合成胰岛素“基因”
胰岛素原的cDNA
分泌胰岛素原的细菌
人生长激素的基因克隆
人生长激素“基因”的制造
关于甲硫氨酸问题
不同类型的干扰素
人α干扰素在大肠杆菌中的高效表达
γ（免疫）干扰素的克隆
用于疫苗的病毒蛋白
口蹄疫病毒的克隆
化学合成的多肽疫苗
人乙型肝炎病毒疫苗
乙型肝炎抗原的基因克隆
重组DNA的研究史
附录A 限制性内切酶
附录B 重组DNA研究中的其它酶类
参考文献
汉英术语索引
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