本书在第一版的基础上,根据应用中发现的问题及生物化学实验的进展做了修改。全书分为四部分,包括44个实验。基础性实验部分重在基本实验技能的培训;综合性实验部分着重实验原理的应用和提高分析能力。这两部分涵盖了与生物化学理论相适应的生物化学实验内容和技术,包括糖、脂、蛋白质、核酸、酶、维生素的分离、纯化、定性或定量分析,功能和代谢的研究等。设计性实验部分在前两部分的基础上为学生提供一个独立实验的空间,着重培养学生的独立科研能力。附录介绍了生物化学实验室规则、实验报告书写、常用实验室操作规范、试剂的配制和一些生物化学常用数据。
样章试读
目录
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第二版前言
第一版前言
第一部分 基础性实验
实验1 纸层析法分离氨基酸 2
实验2 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 10
实验3 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 14
实验4 酶的专一性 16
实验5 酶反应动力学的影响因素 18
实验6 RNA定量测定 22
实验7 DNA定量测定(二苯胺法) 24
实验8 紫外吸收法测定核酸含量 26
实验9 DNA的琼脂糖凝胶电泳 28
实验10 肝糖原的提取和鉴定 32
实验11 卵磷脂的提取和鉴定 34
实验12 油脂酸价的测定 36
实验13 维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法) 38
实验14 血清谷丙转氨酶活力测定 40
第二部分 综合性实验
实验15 SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量 44
实验16 蛋白质印迹 50
实验17 疏水层析分离纯化a淀粉酶 53
实验18 小麦幼苗淀粉酶活性的测定 56
实验19 正交法测定影响淀粉酶活力的几种因素 58
实验20 植物组织中过氧化物酶活力的测定 62
实验21 乳酸脱氢酶活为测定 64
实验22 酵母蔗糖酶的粗分离 66
实验23 离子交换柱层析纯化蔗糖酶 69
实验24 蔗糖酶各级分活性及蛋白质含量的测定 72
实验25 反应时间对产物形成的影响 76
实验26 小麦叶片淀粉酶Vmax和Km测定 78
实验27 底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定 80
实验28 小麦叶片淀粉酶抑制剂动力学反应 82
实验29 质粒DNA的提取、酶切和鉴定 85
实验30 大肠杆菌感受态细胞的制备 92
实验31 小牛胸腺DNA的制备 94
实验32 小牛胸腺DNA熔解温度的测量 97
实验33 植物基因组提取(CTAB法) 100
实验34 萝卜过氧化物酶基因rsprxl的扩增 102
实验35 实时荧光定量PCR 104
实验36 酵母RNA的提取与组分鉴定 107
实验37 粗脂肪的定量测定 109
实验38 丙二醛的测定 112
实验39 发酵过程中无机磷的利用和ATP的生成(ATP的生物合成) 115
第三部分 设计性实验
实验40 蛋白质的沉淀反应和等电点测定 118
实验41 目的基因的扩增与鉴定 121
实验42 影响肝糖原含量的因素 125
实验43 酶反应最适条件的选择 127
实验44 植物过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳 129
主要参考文献 132
附录 133
一、实验室规则 133
二、实验报告书写 133
三、常用实验室操作规范 135
四、试剂的配制 150