本书由植物细胞工程实验技术篇和动物细胞工程实验技术篇共44个实验组成。植物细胞工程实验技术篇由基础性实验、综合性实验和设计性实验三章组成。基础性实验涉及细胞、组织和器官分离培养至成苗驯化移栽,花器官的观察及培养物超低温保存等;综合性实验含微型马铃薯及单倍体诱导,胚培养及原生质体融合培养,农杆菌转化和原生质体瞬时转化等;设计性实验包括植物生长调节物质对植物离体器官形态建成的影响、植物的脱毒培养与离体快繁技术研究、植物体细胞无性系诱导与突变体筛选三个实验。动物细胞工程实验技术篇由动物细胞培养基本技术和杂交瘤与单克隆抗体制备技术两章组成。其中动物细胞培养囊括了动物细胞培养较完整的基本技术体系;杂交瘤与单克隆抗体制备技术由细胞制备,细胞融合和杂交瘤细胞筛选,单克隆抗体检测,杂交瘤细胞克隆化培养,单克隆抗体制备与分离、纯化等7个实验组成。本书实验方法先进可靠,实验步骤详细易操作,具有较广泛的适应性和实用性。
样章试读
目录
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第一篇 植物细胞工程实验技术
第一章 基础性实验 2
实验1-1 植物培养基母液的配制 2
实验1-2 植物培养基的制备 7
实验1-3 植物外植体的初代培养 12
实验1-4 植物离体培养物的继代培养与观察 17
实验1-5 植物根的液体悬浮培养 24
实验1-6 试管苗的生根培养 26
实验1-7 试管苗的驯化与移栽 29
实验1-8 茎尖生长点的剥离、观察与培养 31
实验1-9 花粉发育时期的鉴定 35
实验1-10 植物花器官与胚器官的剥离与观察 40
实验1-11 植物离体授粉技术 43
实验1-12 植物单细胞的分离与培养 48
实验1-13 植物细胞悬浮培养体系的建立 52
实验1-14 植物细胞的生长计量技术 55
实验1-15 植物细胞活力的鉴定 61
实验1-16 微藻细胞的培养 63
实验1-17 植物离体培养物与茎尖生长点的超低温保存 68
第二章 综合性实验 74
实验2-1 马铃薯试管微型薯的诱导 74
实验2-2 植物胚培养技术 78
实验2-3 植物花药培养与单倍体的诱导 85
实验2-4 植物小孢子的培养 91
实验2-5 植物体细胞胚的诱导与人工种子的制备 96
实验2-6 植物原生质体的分离、纯化与融合 105
实验2-7 植物细胞悬浮培养生产有用次生代谢物 114
实验2-8 农杆菌介导的植物遗传转化 119
实验2-9 发状根的诱导培养与次生代谢物的生产 124
实验2-10 外源基因在植物原生质体中的瞬时表达 128
第三章 设计性实验 132
实验3-1 植物生长调节物质对植物离体器官形态建成的影响 132
实验3-2 植物的脱毒培养与离体快繁技术应用 133
实验3-3 植物体细胞无性系诱导与突变体筛选 134
第二篇 动物细胞工程实验技术
第四章 动物细胞培养基本技术 142
实验4-1 动物细胞培养所需器皿和器械的准备 142
实验4-2 动物细胞培养液的制备 146
实验4-3 动物细胞的原代培养 148
实验4-4 动物细胞的传代培养 153
实验4-5 细胞冷冻保存技术 155
实验4-6 冷冻细胞复苏及活力测定 157
实验4-7 体外培养细胞生长曲线的测定 161
第五章 杂交瘤与单克隆抗体制备技术 165
实验5-1 小鼠免疫脾细胞的制备 165
实验5-2 骨髓瘤细胞的制备 169
实验5-3 饲养层细胞的制备 170
实验5-4 动物细胞融合和杂交瘤细胞筛选 172
实验5-5 特异性单克隆抗体的检测 174
实验5-6 杂交瘤细胞克隆化培养 178
实验5-7 单克隆抗体的制备与分离、纯化 180
主要参考文献 185
附录 细胞工程实验室规则 188