弗雷谢尼所著的《动物细胞培养——基本技术指南》历来被看做是该领域的领衔之作。自2000年第四版问世以来,细胞培养及其相关学科的技术方法发展更加迅猛,诸如干细胞、组织工程、克隆以及体外毒性检测方面等均取得长足的甚至突破性的进展,为将这些内容和其他方面的新的资料融入该书,于是有了新的一版——第五版的面世。
第五版除保留原有主要内容之外,为了适应细胞培养新手,尤其是生物制药工业中所涌现的技术人员的需要,专门新开辟了一章“培训纲要”,其中包括基本技能训练、高阶练习以及相关实践等。另外,如同前版一样,本版也详尽介绍了如下内容:原代培养、细胞系、传代、分化、癌细胞和细胞转化、三维培养、大规模培养、分子细胞学技术、污染、特殊设备、细胞培养中可能遇到的难题及对策等。因此,本版最大特色可以概括为全面、新颖和实用。
本书可供有关大学师生尤其是研究生、科研人员、生物工程技术人员、临床医生以及所有从事生命科学研究的人员参考。
样章试读
目录
- 译者的话
前言
缩略语
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1.1 历史背景
1.2 组织培养的优点
1.3 局限性
1.4 体外的主要差异
1.5 组织培养的类型
第2章 培训纲要
2.1 目的
2.2 基本练习
2.3 高阶练习
2.4 特殊练习
第3章 培养细胞的生物学
3.1 培养细胞的环境
3.2 细胞黏附
3.3 细胞增殖
3.4 细胞分化
3.5 细胞信号传递
3.6 能量代谢
3.7 培养的开始
3.8 细胞系的演化
3.9 连续细胞系的形成
3.10 培养细胞的起源
第4章 实验室设计与布局
4.1 规划
4.2 建设与使用
4.3 无菌室或套室布局
4.4 培养
4.5 准备室
第5章 设备
5.1 组织培养实验室的要求
5.2 无菌区
5.3 培养
5.4 准备和灭菌
5.5 储存
5.6 实验室
5.7 专用设备
5.8 消耗性物品
第6章 无菌技术
6.1 无菌技术的目标
6.2 创造无菌环境的各种因素
6.3 灭菌操作
6.4 层流
6.5 标准方法
6.6 仪器和设备
第7章 安全性、生物伦理及验证
7.1 实验室安全
7.2 危险性评估
7.3 标准操作程序
7.4 安全规则
7.5 常规安全
7.6 火
7.7 放射性
7.8 生物危害性
7.9 生物伦理
7.10 验证
第8章 培养器皿和附着物
8.1 附着物
8.2 培养器皿的选择
8.3 特殊系统
8.4 表面处理
第9章 成分明确培养基及补充物
9.1 培养基的发展史
9.2 物理化学特征
9.3 平衡盐溶液
9.4 完全培养基
9.5 血清
9.6 培养基和血清的选择
9.7 其他添加物
第10章 无血清培养基
10.1 含血清培养基的缺点
10.2 无血清培养基的优点
10.3 无血清培养基的缺点
10.4 血清的替代
10.5 无血清培养基的选择
10.6 无血清培养基的研发
10.7 无血清培养基的制备
10.8 无蛋白培养基
10.9 小结
第11章 准备与灭菌
11.1 准备试剂与用品
11.2 设备与液体的灭菌
11.3 设备
11.4 试剂与培养基
11.5 培养基的灭菌
11.6 培养基的质控、检测和储存
第12章 原代培养
12.1 原代培养的类型
12.2 组织分离
12.3 原代培养
第13章 传代培养和细胞系
13.1 传代培养和扩增
13.2 术语定义
13.3 培养物的年龄
13.4 细胞系的命名
13.5 选择细胞系
13.6 常规培养
13.7 传代
第14章 克隆培养及筛选
14.1 克隆培养
14.2 贴壁率的刺激
14.3 悬浮克隆培养
14.4 细胞克隆的分离
14.5 复制性培养
14.6 选择性抑制剂
14.7 遗传变异细胞的筛选
14.8 细胞与基质的相互作用
第15章 细胞分离
15.1 细胞密度及等密度沉降法
15.2 细胞体积与沉降速度
15.3 以抗体为基础的分离技术
15.4 荧光活化的细胞分选法
15.5 其他分离技术
15.6 初试细胞分离者的选择
第16章 细胞鉴定
16.1 鉴定的需求
16.2 保存记录和身世
16.3 真实性验证
16.4 细胞形态学
16.5 染色体含量
16.6 DNA含量
16.7 RNA和蛋白质表达
16.8 酶活性
16.9 抗原标记
16.10 分化
第17章 分化
17.1 体内表现型的表达
17.2 分化的各个阶段
17.3 增殖和分化
17.4 定向和细胞谱系
17.5 干细胞的可塑性
17.6 分化标记物
17.7 诱导分化
17.8 分化和恶性
17.9 应用
第18章 转化和永生化
18.1 细胞系特性的作用
18.2 什么是转化
18.3 遗传不稳定性
18.4 永生性
18.5 生长控制的异常
18.6 肿瘤发生
第19章 污染
19.1 污染源
19.2 微生物污染的类型
19.3 污染的检测
19.4 污染的去除
19.5 交叉污染
19.6 结论
第20章 细胞冷冻保存
20.1 冷冻保存的必要性
20.2 冷冻保存细胞系的获得
20.3 冷冻保存的原理
20.4 冷冻储备的设计与控制
20.5 细胞库
20.6 细胞的运送
第21章 定量
21.1 细胞计数
21.2 细胞重量
21.3 DNA含量
21.4 蛋白质
21.5 合成率
21.6 酶检测和免疫检测标本的制备
21.7 细胞计数术
21.8 重复取样问题
21.9 细胞增殖
21.10 贴壁效率
21.11 标记指数
21.12 细胞周期时间
21.13 细胞迁移
第22章 细胞毒性
22.1 活性、毒性和存活
22.2 体外局限性
22.3 分析的性质
22.4 细胞毒性试验的应用
22.5 转化和诱变
22.6 炎症反应
第23章 特殊类型细胞的培养
23.1 特殊细胞培养技术
23.2 上皮细胞
23.3 间充质细胞
23.4 神经外胚层细胞
23.5 造血细胞
23.6 生殖腺
23.7 干细胞
第24章 肿瘤细胞培养
24.1 肿瘤细胞培养中的问题
24.2 取材
24.3 分离
24.4 原代培养
24.5 肿瘤细胞的特征
24.6 细胞系的建立
24.7 肿瘤细胞的选择培养
24.8 特殊类型肿瘤
第25章 器官型培养
25.1 细胞的相互作用和表型表达
25.2 器官培养
25.3 组织型培养
25.4 三维构建物中细胞的成像
第26章 规模培养
26.1 悬浮规模培养
26.2 单层规模培养
26.3 程序控制
第27章 特殊技术
27.1 淋巴细胞的分离
27.2 放射自显影术
27.3 间隔性记录
27.4 共聚焦显微镜
27.5 细胞同步化
27.6 羊膜细胞培养
27.7 冷血动物细胞的培养
27.8 原位分子杂交
27.9 体细胞融合
27.10 单克隆抗体的制备
27.11 DNA转移
第28章 问题与对策
28.1 细胞生长缓慢
28.2 培养基
28.3 配制培养基各种成分的纯度
28.4 塑料制品
28.5 玻璃器皿
28.6 微生物污染
28.7 化学污染
28.8 原代培养
28.9 分化
28.10 饲养层
28.11 传代
28.12 克隆
28.13 交叉污染
28.14 冻存
28.15 细胞呈颗粒性
28.16 细胞计数
28.17 存活率
第29章 结语
附录Ⅰ 试剂及配制
附录Ⅱ 设备及材料来源
附录Ⅲ 供应商和其他资源
附录Ⅳ 术语
附录Ⅴ 普通教科书及相关期刊
参考文献
索引
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