本书为“分子克隆实验指南系列”之一，是一本全面阐述现代细胞分子生物学最新技术的基本原理、操作步骤与方法评注的大型工具书。全书共18章，内容涉及大肠杆菌、质粒、噬菌体工具，DNA、RNA的制备与分析，工具酶操作，PCR技术，DNA转染，蛋白质表达与分析，蛋白质磷酸化和糖复合物分析，DNA与蛋白质相互作用，免疫学，原位杂交和免疫组化，生物芯片，细胞培养，流式细胞术，细胞凋亡检测，转基因动物等。内容丰富、实用，充分反映了近年来细胞分子生物学技术的迅猛发展。
本书可作为从事细胞生物学、生物化学、分子生物学、生物技术、医药学及农学等生命科学领域的科研、教学人员的指导性参考书。
样章试读
目录
- 序一
序二
前言
第一章 大肠杆菌、质粒和噬菌体
引 言
第一节 大肠杆菌
第二节 质粒
第三节 λ噬菌体及其衍生载体
第四节 丝状噬菌体载体
第五节 黏粒载体
主要参考文献
第二章 DNA的制备与分析
引 言
第一节 DNA溶液的纯化和浓缩
第二节 基因组DNA的制备
第三节 大片段DNA的分离与回收
第四节 DNA小片段的分离与回收
第五节 DNA印迹与杂交分析
第六节 寡核苷酸和DNA片段的纯化
主要参考文献
第三章 RNA的制备与分析
引 言
第一节 真核细胞和原核细胞RNA的制备
第二节 RNA结构分析和合成
主要参考文献
第四章 DNA和RNA的酶学操作
引 言
第一节 限制性内切核酸酶
第二节 限制性作图
第三节 用于修饰与放射性标记核酸的酶
第四节 重组DNA分子的构建
第五节 非同位素探针标记及其应用
主要参考文献
第五章 聚合酶链式反应
引 言
第一节 PCR的基本原理
第二节 PCR的基本技术
第三节 PCR技术的扩展
第四节 用PCR扩增DNA的基本方法
第五节 用PCR定量分析微量DNA
第六节 以低丰度RNA为模板扩增cDNA
第七节 制备直接用于DNA序列测定的PCR产物
第八节 连接介导PCR与基因组足迹分析和测序
第九节 用锚式PCR扩增cDNA
第十节 PCR扩增产物的克隆
第十一节 用PCR差异显示mRNA
主要参考文献
第六章 DNA导入哺乳动物细胞
引 言
第一节 DNA转染真核细胞
第二节 DNA转染哺乳动物细胞的检测
第三节 用逆转录病毒载体转导基因
主要参考文献
第七章 蛋白质的表达
引 言
第一节 蛋白质在大肠杆菌中的表达
第二节 杆状病毒表达系统
主要参考文献
第八章 蛋白质分析
引 言
第一节 蛋白质的光吸收法和生物化学法定量
第二节 蛋白质的电泳分离
第三节 蛋白质的检测
第四节 蛋白质的常规层析法纯化
第五节 高效液相色谱分离和纯化蛋白质
第六节 用免疫沉淀法纯化蛋白质
第七节 专门应用
主要参考文献
第九章 DNA与蛋白质的相互作用
引 言
第一节 哺乳动物细胞核或细胞质内蛋白的提取
第二节 用凝胶电泳进行迁移率改变试验检测DNA结合
第三节 甲基化和尿嘧啶干扰反应分析蛋白质-DNA的作用
第四节 DNase I足迹法分析蛋白-DNA结合位点
第五节 蛋白质与核酸的紫外交联反应
第六节 用生物素／链亲和素亲和系统纯化DNA结合蛋白
第七节 编码DNA结合蛋白cDNA克隆的检测、纯化和鉴定
第八节 滤膜分离游离DNA及与蛋白质结合的DNA
第九节 体外合成克隆基因蛋白质分析DNA-蛋白质反应
第十节 序列特异性DNA结合蛋白的亲和层析纯化
主要参考文献
第十章 蛋白质磷酸化的分析
引 言
第一节 磷酸化蛋白质的标记和制备
第二节 标记的磷酸化蛋白质的检测
第三节 未标记的磷酸化蛋白质的检测
第四节 蛋白激酶活性的检测
第五节 需要特殊仪器的蛋白质磷酸化分析
主要参考文献
第十一章 糖复合物的制备与分析
引 言
第一节 糖复合物及其纯化
第二节 糖复合物中糖的检测
第三节 糖复合物中糖的释放
主要参考文献
第十二章 免疫学技术
引 言
第一节 荧光免疫技术
第二节 酶免疫技术
第三节 发光免疫测定技术
第四节 生物素与亲和素标记技术
主要参考文献
第十三章 免疫组织化学和原位杂交技术
引 言
第一节 免疫组化技术的分类
第二节 原位杂交技术的分类
第三节 免疫组化染色和原位杂交技术中的组织处理
第四节 常用的免疫组化技术
第五节 原位杂交技术中分子探针的制备
第六节 常用原位杂交技术
主要参考文献
第十四章 生物芯片技术
引 言
第一节 基因芯片
第二节 蛋白质芯片
第三节 组织微阵列
第四节 芯片实验室
主要参考文献
第十五章 细胞培养技术
引 言
第一节 细胞培养的基本概念
第二节 细胞培养的类型与细胞生物学
第三节 培养细胞的生存条件
第四节 细胞培养的常用操作技术
第五节 细胞外基质在组织和细胞培养中的作用
第六节 培养细胞的生物学污染及其预防检测和排除
第七节 成纤维细胞的分离与培养
第八节 上皮细胞的培养
第九节 人毛细血管内皮细胞分离
第十节 人淋巴细胞的分离与转化培养
第十一节 鼠胚干细胞的体外培养与体外分化
第十二节 原代神经细胞的分离和培养
第十三节 鸡胚肌母细胞的分离和培养
第十四节 新生小鼠心肌细胞的分离和培养
第十五节 成年鼠心室肌细胞的分离和培养
第十六节 肝星状细胞的培养
主要参考文献
第十六章 流式细胞术
引 言
第一节 用于流式细胞术检测的单细胞悬液制备
第二节 非同步化细胞的细胞周期分析
第三节 单个细胞细胞周期素的检测
第四节 评估肿瘤细胞对化疗药物的耐药性
第五节 单细胞内细胞因子产物检测
主要参考文献
第十七章 细胞凋亡的研究方法
引 言
第一节 细胞凋亡的形态学研究
第二节 细胞凋亡的生物化学研究方法
第三节 细胞凋亡的免疫化学分析方法
第四节 细胞凋亡的分子生物学研究方法
第五节 流式细胞仪检测凋亡细胞的几种常用方法
主要参考文献
第十八章 转基因动物
引 言
第一节 转基因技术的基本原理
第二节 转基因动物常用制备方法
第三节 转基因动物的应用
第四节 转基因技术展望
主要参考文献
附录
附录1 细胞分子生物学常用缩写和数据
附录2 实验室常用仪器和设备
附录3 细胞分子生物学常用操作技术
主要参考文献
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